灵仙新苷

产品名称: 灵仙新苷
英文名: Clematichinenoside AR
中文别名:
英文别名:
Cas 号: 761425-93-8
产品编码:BP3862
分子式: C₈₂H₁₃₄O₄₃
分子量: 1807.93
来源:
物理性状:
化合物类型:

纯度: 95%~99%
分析方法: HPLC-DAD or/and HPLC-ELSD
鉴定方法: 质谱（Mass）, 核磁（NMR）
包装: 棕色小玻璃瓶，按客户需求包装。
可以满足克级以上大量需求，详情请咨询。


中国药科大学的专利公开了灵仙新苷的2个新用途：

1，申请(专利)号：CN201911017302.9

摘要：本发明公开了灵仙新苷在制备治疗雷公藤甲素所致肝损伤的药物中的应用,从传统中药威灵仙中获得的灵仙新苷对雷公藤甲素在治疗类风湿性关节炎(RA)时所致肝损伤具有保护作用.药理学试验证明,灵仙新苷可以有效降低给予雷公藤甲素的CIA模型大鼠的肝毒性相关血清生化指标,并且在细胞水平有同样的效果,这一结果进一步通过代谢组学的方法得到了验证.

2，申请(专利)号：CN202011115167.4

摘要：本发明公开了灵仙新苷在制备抗肿瘤产品和/或抗肿癌细胞产品中的应用.本发明研究表明,AR能够显著抑制人结直肠癌细胞的生长,增殖;AR对人结直肠癌SW480移植瘤裸鼠的主要器官包括肝,脾,肺,肾,结肠和股骨的组织病理学无明显影响,表明AR对上述器官无明显毒性作用;AR通过下调HIF1α/ERK/Caspase3/VEGFR2通路发挥肿瘤抑制作用及抗肿瘤血管生成的作用.且安全性较高,总体安全性优于伊利替康.

灵仙新苷的HPLC图谱

储存条件：短期保存 2~8℃，长期保存 -20 ~ -80℃

引言/概述

天然产物作为药物发现的重要源泉，在人类与疾病的漫长斗争史中扮演着不可替代的角色。中国传统中药蕴含着丰富的活性化学成分，为现代药理学研究提供了宝贵的先导化合物库。威灵仙（Clematis chinensis Osbeck）作为一味常用中药，首载于《神农本草经》，具有祛风除湿、通络止痛的功效，临床上广泛用于治疗风湿痹痛、肢体麻木、跌打损伤等症。现代药理学研究揭示，威灵仙的多种药理活性与其所含的三萜皂苷类成分密切相关。其中，灵仙新苷（Clematichinenoside AR，简称AR）作为一种从威灵仙根及根茎中分离得到的齐墩果烷型三萜皂苷，近年来因其显著且多样的生物学活性，特别是抗炎、免疫调节及心血管保护作用，引起了国内外学者的广泛关注。

灵仙新苷的发现与深入研究，不仅为阐释威灵仙的传统功效提供了现代科学依据，更揭示了其在治疗慢性炎症性疾病、自身免疫性疾病以及动脉粥样硬化等复杂疾病方面的巨大潜力。动脉粥样硬化（Atherosclerosis, AS）作为一种慢性炎症性血管疾病，是心脑血管事件（如心肌梗死、脑卒中）的主要病理基础。传统的降脂治疗虽能降低风险，但残余炎症风险仍是临床难题。灵仙新苷通过多靶点、多通路调控炎症反应，展现出干预动脉粥样硬化发生发展的独特优势。此外，其在类风湿性关节炎、神经病理性疼痛、急性肺损伤等模型中的保护作用也相继被报道。本文旨在系统梳理灵仙新苷的化学结构、植物来源、药理活性、作用机制及成药性等方面的研究进展，以期为该天然产物的深入开发与临床转化提供参考。

化学结构与理化性质

灵仙新苷的化学结构是其发挥生物学活性的基础。根据现有研究，灵仙新苷属于齐墩果烷型五环三萜皂苷。其苷元为齐墩果酸（Oleanolic acid），在C-3位和C-28位分别连接有复杂的糖链。具体而言，C-3位的糖链通常由葡萄糖、鼠李糖、木糖等单糖通过特定的糖苷键连接而成；C-28位的糖链则通过酯键与苷元相连，形成双糖链皂苷。这种复杂的糖链结构不仅决定了其分子的极性、溶解性，也对其与生物体内靶蛋白的相互作用至关重要。完整的分子结构解析通常依赖于高分辨质谱（HR-MS）和一维、二维核磁共振波谱（1D/2D NMR）技术，如HMBC、HSQC、NOESY等，以确定糖的连接顺序、位置及构型。

从理化性质来看，灵仙新苷的分子量高达1807.9310 Da，属于大分子天然产物。其脂水分配系数（LogP）为1.2213，表明其具有一定的亲水性，这与分子中含有多个羟基的糖链结构相符。拓扑极性表面积（TPSA）高达668.7300 Ų，远高于口服药物通常推荐的140 Ų上限，这预示着其跨膜渗透能力较差，口服生物利用度可能面临挑战。其水溶性参数为2.4303，显示在水中有一定的溶解度，这为其在生理环境中的溶解和转运提供了基础。此外，根据现有数据，灵仙新苷的血脑屏障（BBB）穿透能力较低，提示其中枢神经系统作用可能主要依赖于外周机制或通过间接调节实现。这些理化性质为后续的剂型设计和给药途径选择提供了重要线索。

植物来源与提取方法

灵仙新苷的主要植物来源为毛茛科铁线莲属植物威灵仙（Clematis chinensis Osbeck）。此外，同属的其他植物，如棉团铁线莲（Clematis hexapetala Pall.）和东北铁线莲（Clematis manshurica Rupr.），也可能含有该成分，但含量有所差异。威灵仙药材的药用部位为其干燥根及根茎，通常在秋季采挖，除去泥沙，晒干后入药。

提取灵仙新苷的经典方法主要基于其极性较大的特点。由于含有多个糖基，灵仙新苷易溶于水、甲醇、乙醇等极性溶剂，而难溶于石油醚、氯仿等非极性溶剂。因此，常用的提取溶剂包括不同浓度的乙醇（如70%乙醇或95%乙醇）或甲醇。提取方式多采用回流提取或超声辅助提取，以提高效率并减少热敏性成分的降解。提取液经减压浓缩后，通常采用大孔吸附树脂（如D101、AB-8型）进行初步纯化，用水及不同浓度的乙醇梯度洗脱，富含皂苷的部位通常集中在30%-70%的乙醇洗脱部分。

进一步的分离纯化则需要结合多种色谱技术。正相硅胶柱色谱是分离三萜皂苷的常用手段，使用氯仿-甲醇-水等溶剂系统进行梯度洗脱。对于结构相似的皂苷，反相硅胶（如ODS）柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及制备型高效液相色谱（Pre-HPLC）则更为有效。通过反复的柱层析和重结晶，最终可以获得高纯度的灵仙新苷单体。近年来，高速逆流色谱（HSCCC）等新型分离技术也被应用于皂苷类成分的分离，展现出分离效率高、样品损失少等优势。建立稳定、高效、可重复的提取纯化工艺，是保障灵仙新苷后续药理学研究和成药性开发的基础。

药理活性研究

灵仙新苷的药理活性研究主要集中在其抗炎、免疫调节及对心血管系统的保护作用，尤其在动脉粥样硬化领域表现出色。

1. 抗炎与免疫调节活性
炎症是多种疾病的共同病理基础。灵仙新苷在多种炎症模型中显示出强大的抗炎活性。在脂多糖（LPS）刺激的巨噬细胞模型中，AR能够显著抑制促炎细胞因子如肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）和一氧化氮（NO）的产生。在体内，AR对胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠模型具有显著的治疗效果，能够减轻关节肿胀、骨侵蚀和滑膜炎症，其作用机制与抑制NF-κB信号通路和调节Th17/Treg细胞平衡有关。此外，AR在急性肺损伤、溃疡性结肠炎等模型中同样表现出保护作用，提示其具有广谱的抗炎潜力。

2. 抗动脉粥样硬化作用
动脉粥样硬化被视为一种慢性炎症性疾病。灵仙新苷对AS的干预作用是其研究热点之一。研究表明，AR能够通过多种途径抑制AS的进展：
- 保护血管内皮细胞：氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）是导致内皮损伤和AS启动的关键因素。AR能够抑制ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）凋亡和功能障碍，减少黏附分子（如VCAM-1、ICAM-1）的表达，从而抑制单核细胞向内皮下的黏附。
- 抑制泡沫细胞形成：巨噬细胞摄取ox-LDL形成泡沫细胞是AS的核心环节。AR能够下调清道夫受体（如SR-A、CD36）的表达，减少巨噬细胞对ox-LDL的摄取，同时促进胆固醇外流，从而抑制泡沫细胞的形成。
- 抑制血管平滑肌细胞增殖与迁移：血管平滑肌细胞（VSMC）的异常增殖和迁移是AS斑块进展和血管重塑的重要原因。AR能够抑制血小板衍生生长因子（PDGF）诱导的VSMC增殖和迁移，这可能与干预MAPK和PI3K/Akt信号通路有关。

3. 镇痛与神经保护作用
基于威灵仙的传统功效，灵仙新苷的镇痛作用也得到证实。在福尔马林诱导的炎性疼痛和慢性压迫性损伤（CCI）诱导的神经病理性疼痛模型中，AR均表现出显著的镇痛效果。其机制可能与抑制脊髓水平的小胶质细胞活化，以及下调瞬时受体电位香草酸亚型1（TRPV1）和瞬时受体电位锚蛋白亚型1（TRPA1）的表达有关。此外，AR在帕金森病、阿尔茨海默病等神经退行性疾病模型中也显示出一定的神经保护潜力。

4. 其他活性
初步研究还发现，灵仙新苷具有抗肿瘤活性，能够抑制多种癌细胞的增殖并诱导凋亡；同时，它对肝脏和肾脏也表现出一定的保护作用，能够减轻化学性肝损伤和肾纤维化。

作用机制与分子靶点

灵仙新苷的药理活性并非单一靶点作用的结果，而是通过调控多条信号通路和多个分子靶点实现的网络药理学特征。其核心机制主要围绕炎症反应的调控展开。

1. 调控NF-κB信号通路
NF-κB是炎症反应的核心转录因子。灵仙新苷能够有效抑制IκB激酶（IKBKB）的磷酸化，阻止IκBα的降解，从而抑制NF-κB（p65/RELA）的核转位和转录活性。这直接导致其下游靶基因，包括促炎细胞因子（TNF-α、IL-6）、趋化因子、黏附分子以及诱导型一氧化氮合酶（NOS2）和环氧合酶-2（PTGS2/COX-2）的表达下调。这是AR发挥抗炎作用的核心机制之一。

2. 调控JAK/STAT3信号通路
IL-6/STAT3信号通路在慢性炎症和自身免疫性疾病中扮演关键角色。研究表明，灵仙新苷可以抑制IL-6诱导的STAT3的磷酸化（Tyr705位点），从而阻断STAT3的二聚化和核转位，减少其靶基因（如VEGF、Bcl-2、Cyclin D1）的表达。这一机制在AR抑制类风湿性关节炎滑膜炎症和肿瘤细胞增殖中尤为重要。

3. 调控NLRP3炎症小体
NLRP3炎症小体是介导IL-1β和IL-18成熟和分泌的关键蛋白复合物，与多种炎症性疾病相关。灵仙新苷被发现能够抑制NLRP3炎症小体的组装和活化。其机制可能包括抑制活性氧（ROS）的产生、阻断钾离子外流，或直接与NLRP3蛋白相互作用，从而抑制CASP1（Caspase-1）的激活，减少IL-1β的成熟和释放。这在动脉粥样硬化、痛风等疾病模型中具有重要意义。

4. 调控瞬时受体电位（TRP）通道
TRPV1和TRPA1是介导疼痛和神经源性炎症的关键离子通道。灵仙新苷能够直接或间接抑制这两种通道的活性。研究表明，AR可以抑制激动剂（如辣椒素、芥子油）诱导的TRPV1和TRPA1介导的钙离子内流，从而发挥镇痛和止痒作用。这可能与AR分子中的糖链结构能够与通道蛋白的胞外域相互作用有关。

5. 其他靶点与通路
除了上述核心机制，灵仙新苷还被报道能够抑制MAPK（如p38、ERK、JNK）信号通路的磷酸化，激活Nrf2/ARE抗氧化通路，以及调节凋亡相关蛋白（Bax、Bcl-2）的表达。这些多靶点、多通路的协同作用，共同构成了灵仙新苷复杂的药理作用网络。

成药性评价与药代动力学

将灵仙新苷从活性天然产物转化为临床药物，必须对其成药性进行系统评价。其理化性质（高分子量、高TPSA）提示其口服吸收可能不佳，这是其成药性面临的主要挑战。

1. 药代动力学特征
现有的药代动力学研究（主要基于动物实验）表明，灵仙新苷的口服生物利用度较低。这与其大分子、高极性的结构特点一致，导致其难以通过被动扩散穿越胃肠道上皮细胞。口服给药后，血浆中检测到的原型药物浓度很低，大部分药物可能以原型或代谢物的形式随粪便排出。然而，研究发现，口服AR后，其代谢产物（如去糖基化的次级苷或苷元）可能进入体循环并发挥药效。此外，肠道菌群对AR的代谢转化也至关重要，可能将其转化为活性更强的代谢产物。静脉注射给药则能获得较高的血药浓度。目前，关于AR在体内的分布、代谢（特别是肝脏代谢酶CYP450的参与）和排泄途径的研究尚不充分，需要进一步深入。

2. 安全性评价
初步的安全性评价结果较为乐观。基于Ames试验的结果（0.0），灵仙新苷显示出无致突变性。hERG抑制试验结果为阴性，表明其引发心脏QT间期延长和尖端扭转型室性心动过速的风险较低。在急性毒性实验中，AR的半数致死量（LD50）较高，显示出较好的安全性窗口。然而，长期毒性、生殖毒性以及免疫原性等评价仍需完善。

3. 剂型优化策略
鉴于口服生物利用度低的问题，开发新型给药系统是推动灵仙新苷临床转化的关键。可能的策略包括：
- 纳米载药系统：如脂质体、聚合物纳米粒、固体脂质纳米粒等，可以包裹AR，提高其溶解度、保护其不被胃肠道降解，并通过淋巴系统转运或内吞作用促进吸收。
- 磷脂复合物：与磷脂形成复合物，可以增加AR的脂溶性，改善其跨膜能力。
- 前药设计：在AR的糖链或羟基上引入特定的基团，如氨基酸酯或磷酸酯，利用体内酶解或转运体介导的摄取，提高口服吸收。
- 改变给药途径：对于某些适应症（如类风湿性关节炎、神经病理性疼痛），可考虑开发经皮给药制剂或注射剂（如脂质微球注射液），以绕过口服吸收障碍。

临床应用前景与展望

灵仙新苷作为一种具有多靶点、多途径作用特点的天然产物，在多种疾病的治疗中展现出广阔的应用前景。

1. 动脉粥样硬化及其相关心脑血管疾病
这是AR最具潜力的应用方向。鉴于其通过抗炎、保护内皮、抑制泡沫细胞形成和VSMC增殖等多重机制抗AS，AR有望开发成为一类新型的“抗炎抗动脉粥样硬化”药物。特别是对于他汀类药物不耐受或存在残余炎症风险的患者，AR可能提供一种新的治疗选择。未来需要开展大规模、长期、随机对照的临床研究，以验证其在心血管终点事件（如心肌梗死、脑卒中、心血管死亡）方面的获益。

2. 慢性炎症性疾病
包括类风湿性关节炎、骨关节炎、溃疡性结肠炎等。AR在动物模型中已显示出与一线药物（如甲氨蝶呤）相当的疗效，且可能具有更少的副作用。其通过抑制NF-κB、STAT3和NLRP3炎症小体，同时调节免疫细胞平衡，有望成为治疗这些疾病的有效药物。

3. 疼痛管理
特别是慢性炎性疼痛和神经病理性疼痛。AR通过抑制TRPV1/TRPA1通道和脊髓小胶质细胞活化，提供了一种非阿片类、非甾体抗炎药（NSAIDs）的镇痛新策略，有望避免阿片类药物的成瘾性和NSAIDs的胃肠道及心血管风险。

4. 未来研究方向
- 深入机制研究：利用化学生物学、结构生物学等手段，明确AR与关键靶蛋白（如TRPV1、NLRP3、STAT3）的直接结合位点和结合模式。
- 构效关系研究：通过比较AR与其类似物（如不同糖链结构的皂苷）的活性差异，明确发挥关键药效的基团，为结构优化提供指导。
- 系统药代动力学研究：建立灵敏的LC-MS/MS检测方法，全面阐明AR及其代谢物在体内的吸收、分布、代谢、排泄（ADME）过程，特别是肠道菌群代谢的作用。
- 临床转化研究：在完成全面的临床前药效学和毒理学评价后，设计合理的临床试验方案，首先探索其在特定适应症（如类风湿性关节炎）中的安全性和初步疗效。

结语

灵仙新苷作为源自传统中药威灵仙的齐墩果烷型三萜皂苷，凭借其独特的化学结构和显著的抗炎、免疫调节及心血管保护活性，已成为天然产物药理学领域一颗引人注目的新星。其通过调控NF-κB、STAT3、NLRP3炎症小体以及TRP通道等多个关键分子靶点，在动脉粥样硬化、类风湿性关节炎、神经病理性疼痛等多种复杂疾病的治疗中展现出巨大潜力。尽管其大分子、高极性的理化性质给口服给药带来了挑战，但通过纳米制剂、前药设计等现代药剂学手段，有望克服这一瓶颈。未来，随着对其作用机制、构效关系及药代动力学特征的深入阐明，以及临床研究的稳步推进，灵仙新苷及其衍生物极有可能成为一类具有自主知识产权的新型天然药物，为人类健康事业做出贡献。从古老的中药中发现新的活性分子，并通过现代科学方法将其转化为临床用药，这正是天然产物药物研发的魅力与价值所在。