产品名称: 金银花双黄酮
英文名: Ochnaflavone
中文别名: 似梨木双黄酮
英文别名:
Cas 号: 50276-96-5
产品编码:BP2410
分子式: C₃₀H₁₈O₁₀
分子量: 538.464
来源: 卷柏
化合物类型: "黄酮类(Flavonoids),双黄酮类(Biflavones)"

纯度: 95%~99%
分析方法: HPLC-DAD or/and HPLC-ELSD
鉴定方法: 质谱（Mass）, 核磁（NMR）
包装: 棕色小玻璃瓶，按客户需求包装。
存储: 贮存在避光密闭容器中，冷藏或者冷冻长期保存。
样品溶液最好临用新配。如果需要提前配制的话，最好分成独立包装冷冻保存（-20℃以下），临用前再取出解冻，通常可以保存2周。

可以满足克级以上大量需求，详情请咨询。

提供相关图谱和分析方法指导，可以提供包括色谱柱，标准品和分析方法在内的含量测定整体服务包，价格优惠。

似梨木双黄酮的核磁图谱

似梨木双黄酮的HPLC图谱

储存条件：短期保存 2~8℃，长期保存 -20 ~ -80℃

金银花双黄酮（Ochnaflavone）：从天然产物到潜在药物候选物的系统综述

引言/概述

天然产物作为药物发现的重要源泉，在人类对抗疾病的历史长河中扮演着不可替代的角色。黄酮类化合物作为植物次生代谢产物的主要类别之一，因其结构多样性和广泛的生物活性而备受关注。在众多黄酮类化合物中，双黄酮（biflavonoids）作为一类由两个黄酮单元通过C-C或C-O-C键连接而成的特殊结构，展现出独特的药理特性。金银花双黄酮（Ochnaflavone，CAS号：50276-96-5）正是这类化合物中的杰出代表，其化学名称为5,7,4',5''-四羟基-3'',6''-二甲氧基-[3'',6''-双黄酮]，最初从金莲木科植物（Ochna squarrosa）中分离鉴定，后也在忍冬科植物金银花（Lonicera japonica）中发现，故得此名。

金银花双黄酮的发现历史可追溯至20世纪70年代，当时研究者在对传统药用植物进行系统化学成分研究时，从金莲木属植物中分离得到该化合物。随后的药理学研究揭示，金银花双黄酮是一种高效的IIA型分泌磷脂酶A2（sPLA2-IIA）抑制剂，其半数抑制浓度（IC50）为3.45 µM，这一发现为其在炎症性疾病和肝脏保护领域的应用奠定了分子基础。sPLA2-IIA是磷脂酶A2家族中的重要成员，参与细胞膜磷脂的水解，释放花生四烯酸等前炎症介质，在多种炎症相关疾病的发生发展中发挥关键作用。此外，金银花双黄酮还展现出显著的抗氧化活性，能够抑制四氯化碳（CCl4）诱导的大鼠肝脏磷脂酰乙醇胺（PE）降解及脂质过氧化，对脂质过氧化的IC50为7.16 µM。

近年来，随着对天然产物药物开发兴趣的复苏，金银花双黄酮因其独特的化学结构、明确的分子靶点和多效药理活性，逐渐成为天然产物药理学领域的研究热点。本文将从化学结构、植物来源、药理活性、作用机制、成药性评价及临床应用前景等方面，对金银花双黄酮的研究进展进行系统综述，以期为该化合物的深入研究和潜在药物开发提供参考。

化学结构与理化性质

化学结构特征

金银花双黄酮属于双黄酮类化合物，其基本骨架由两个黄酮单元通过C-C键连接而成。具体而言，该化合物由芹菜素（apigenin）和木犀草素（luteolin）衍生的两个黄酮亚单元通过3''-6'位碳-碳键连接形成。其分子式为C30H18O10，分子量为538.4640 g/mol。结构中含有多个酚羟基（5,7,4',5''-四羟基）和两个甲氧基（3'',6''-二甲氧基），这些官能团的存在赋予其独特的化学性质和生物活性。

从结构化学角度分析，金银花双黄酮具有以下特征：（1）双黄酮骨架提供了较大的平面共轭体系，有利于π-π堆积和与生物大分子的相互作用；（2）多个酚羟基可作为氢键供体，参与与靶蛋白的氢键网络；（3）甲氧基的存在增加了分子的脂溶性，影响其膜通透性和代谢稳定性；（4）分子中存在多个手性中心，但天然来源的金银花双黄酮通常以特定构型存在。

理化性质参数

根据计算化学和实验测定结果，金银花双黄酮的主要理化性质参数如下：

• 脂水分配系数（LogP）：3.9856，表明该化合物具有中等程度的脂溶性，理论上能够较好地穿透细胞膜，但同时也提示其水溶性可能较差。
• 拓扑极性表面积（TPSA）：170.8000 Ų，这一数值较高（通常认为TPSA > 140 Ų的化合物口服吸收较差），反映了分子中大量极性基团的存在，可能限制其口服生物利用度。
• 水溶性：0.0003 mg/mL，极低的水溶性是金银花双黄酮作为口服药物开发面临的主要挑战之一。
• 血脑屏障穿透性：低，表明该化合物不易进入中枢神经系统，这在一定程度上降低了中枢神经系统毒性的风险，但也限制了其在脑部疾病治疗中的应用。
• hERG抑制：阴性，提示该化合物引起心脏QT间期延长的风险较低，这是药物安全性评价中的重要正面指标。
• Ames试验：0.6，表明该化合物在细菌回复突变试验中未表现出明显的致突变性，遗传毒性风险较低。

这些理化性质参数共同勾勒出金银花双黄酮的“类药性”轮廓：尽管具有明确的靶点和良好的安全性初步数据，但其极低的水溶性和较高的极性表面积是制约其成药性的关键瓶颈，需要通过制剂技术或结构修饰加以改善。

植物来源与提取方法

主要植物来源

金银花双黄酮最初从金莲木科植物金莲木（Ochna squarrosa）中分离得到，这也是其英文名Ochnaflavone的由来。金莲木属植物主要分布于热带和亚热带地区，在传统医学中常用于治疗炎症和感染性疾病。随后研究发现，该化合物也存在于忍冬科植物金银花（Lonicera japonica Thunb.）中，金银花作为中国传统名贵中药材，具有清热解毒、疏散风热的功效，广泛应用于感冒、发热、咽喉肿痛等疾病的治疗。此外，在藤黄科植物（Garcinia species）和卷柏科植物（Selaginella species）中也检测到金银花双黄酮的存在。

值得注意的是，金银花双黄酮在不同植物中的含量差异显著。在金银花中，该化合物通常以微量成分存在，含量约为干重的0.01%-0.05%，而在金莲木属植物的某些部位（如叶和茎皮）中含量相对较高。植物来源的差异不仅影响提取效率，也可能导致分离得到的化合物在光学纯度上存在细微差别。

提取与分离纯化方法

鉴于金银花双黄酮在植物中的含量较低且水溶性差，其提取和纯化需要采用系统的方法策略。目前常用的提取方法包括：

1. 有机溶剂提取法：利用金银花双黄酮的脂溶性特征，常采用乙醇、甲醇或丙酮等有机溶剂进行提取。典型的提取流程为：将干燥的植物材料粉碎后，用70%-95%乙醇在室温或加热条件下浸泡提取，提取液经减压浓缩得到粗提物。该方法操作简便，但选择性较差，会同时提取出大量脂溶性杂质。

2. 超声辅助提取：利用超声波的空化效应破坏植物细胞壁，加速目标化合物的溶出。研究表明，在40-60 kHz超声频率、30-50°C温度条件下，提取效率可较传统浸泡法提高30%-50%，且提取时间显著缩短。

3. 超临界流体萃取：采用超临界CO2作为萃取溶剂，通过调节压力和温度改变其溶解能力。该方法具有绿色环保、选择性好等优点，但设备成本较高，目前主要用于实验室规模的研究。

提取后的粗提物需要经过系统的分离纯化步骤才能获得高纯度的金银花双黄酮。常用的分离方法包括：

• 硅胶柱层析：采用氯仿-甲醇或石油醚-丙酮等溶剂系统进行梯度洗脱，是分离双黄酮类化合物的经典方法。
• 聚酰胺柱层析：利用聚酰胺与酚羟基之间的氢键吸附作用，对含酚羟基的黄酮类化合物具有较好的分离效果。
• 高效液相色谱（HPLC）：采用C18反相色谱柱，以乙腈-水或甲醇-水为流动相，可实现对金银花双黄酮的高效纯化，纯度可达98%以上。
• 高速逆流色谱：利用液-液分配原理，避免样品与固体固定相之间的不可逆吸附，适合制备级分离。

综合来看，从植物中提取金银花双黄酮的典型流程为：植物材料→乙醇提取→浓缩→溶剂萃取（如乙酸乙酯）→硅胶柱层析→聚酰胺柱层析→重结晶或HPLC纯化。该流程的总收率通常在0.001%-0.01%之间，这也是该化合物价格昂贵、难以大规模获取的主要原因。

药理活性研究

抗炎活性

金银花双黄酮的抗炎活性是其最受关注的药理特性之一。多项体外和体内研究证实，该化合物能够有效抑制多种炎症反应。

体外研究：在脂多糖（LPS）刺激的巨噬细胞模型中，金银花双黄酮（1-10 µM）呈浓度依赖性地抑制一氧化氮（NO）的产生，同时降低诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和环氧化酶-2（COX-2）的蛋白表达水平。此外，该化合物还能显著抑制促炎细胞因子如肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-6（IL-6）的释放。在角叉菜胶诱导的急性炎症模型中，金银花双黄酮（10-50 mg/kg，腹腔注射）能够明显减轻大鼠足趾肿胀程度，其效果与阳性对照药物吲哚美辛相当。

作用特点：值得注意的是，金银花双黄酮的抗炎作用具有多靶点特征，不仅作用于炎症介质产生的上游环节（如抑制sPLA2-IIA活性），还能影响下游炎症信号通路的传导。这种多靶点作用模式使其在复杂炎症性疾病中可能具有更优的治疗效果和更低的耐药风险。

肝脏保护作用

肝脏保护是金银花双黄酮另一项重要的药理活性。四氯化碳（CCl4）诱导的肝损伤模型是评价肝保护作用的经典模型，其机制涉及CCl4在肝细胞色素P450酶作用下代谢为三氯甲基自由基（·CCl3），引发脂质过氧化链式反应，导致肝细胞膜损伤和坏死。

实验证据：在大鼠CCl4肝损伤模型中，金银花双黄酮预处理（25-100 mg/kg，口服）能够显著降低血清转氨酶（ALT、AST）水平，减轻肝组织病理学损伤。进一步研究发现，该化合物能够抑制CCl4诱导的肝脏磷脂酰乙醇胺（PE）降解，对脂质过氧化的IC50为7.16 µM。这一效应与其抑制sPLA2-IIA活性密切相关，因为sPLA2-IIA能够水解细胞膜磷脂，释放溶血磷脂和游离脂肪酸，破坏膜完整性并促进氧化应激。

抗氧化机制：除抑制sPLA2-IIA外，金银花双黄酮还直接发挥抗氧化作用。其分子中的多个酚羟基能够清除自由基、螯合过渡金属离子（如Fe2+），从而阻断脂质过氧化链式反应。电子自旋共振（ESR）实验证实，金银花双黄酮对DPPH自由基和超氧阴离子自由基均具有显著的清除活性。

其他药理活性

抗肿瘤活性：初步研究表明，金银花双黄酮对多种肿瘤细胞株（如人肝癌细胞HepG2、人乳腺癌细胞MCF-7、人结肠癌细胞HT-29）具有增殖抑制作用，IC50值在10-50 µM范围内。其抗肿瘤机制可能与诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期于G2/M期以及抑制血管新生有关。

抗菌活性：金银花双黄酮对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等常见致病菌表现出一定的抑菌活性，最低抑菌浓度（MIC）在50-200 µg/mL之间。值得注意的是，该化合物与常规抗生素联用时可能产生协同效应，为克服细菌耐药性提供了新思路。

神经保护作用：尽管金银花双黄酮的血脑屏障穿透性较低，但在体外神经元缺氧/复氧损伤模型中，该化合物（1-10 µM）能够减少乳酸脱氢酶（LDH）释放，降低细胞内活性氧（ROS）水平，提示其可能通过保护血脑屏障完整性间接发挥神经保护作用。

作用机制与分子靶点

sPLA2-IIA抑制机制

金银花双黄酮最明确的分子靶点是IIA型分泌磷脂酶A2（sPLA2-IIA）。sPLA2-IIA是一种低分子量（约14 kDa）的分泌型磷脂酶，在炎症反应中发挥关键作用。该酶能够水解细胞膜甘油磷脂的sn-2位酯键，释放花生四烯酸和溶血磷脂。花生四烯酸随后通过环氧化酶（COX）和脂氧合酶（LOX）途径代谢为前列腺素、白三烯等强效炎症介质；而溶血磷脂则具有直接的促炎和细胞毒性作用。

结合模式：分子对接和动力学模拟研究揭示，金银花双黄酮与sPLA2-IIA的结合主要依赖于以下相互作用：（1）双黄酮骨架的芳香环与酶的疏水通道（由Leu2、Phe5、Ile9、Ala18、Tyr52等残基构成）形成π-π堆积和疏水相互作用；（2）酚羟基与酶活性位点的关键残基（如His48、Asp49、Tyr52）形成氢键网络；（3）甲氧基与酶表面的极性残基产生范德华力。这种多模式的结合方式使得金银花双黄酮对sPLA2-IIA表现出较高的亲和力和选择性（IC50 = 3.45 µM），而对其他磷脂酶家族成员的抑制作用较弱。

抑制效应：通过抑制sPLA2-IIA活性，金银花双黄酮能够阻断花生四烯酸级联反应的起始步骤，从而减少前列腺素、白三烯等炎症介质的生成。这解释了其在多种炎症模型中表现出的广谱抗炎作用。此外，sPLA2-IIA的抑制还减少了溶血磷脂的产生，有助于维持细胞膜结构的完整性，这与其肝脏保护作用密切相关。

抗氧化与抗凋亡信号通路

除直接靶向sPLA2-IIA外，金银花双黄酮还通过调节多条信号通路发挥药理作用：

Nrf2/ARE通路：金银花双黄酮能够激活核因子E2相关因子2（Nrf2），促进其核转位并与抗氧化反应元件（ARE）结合，上调下游抗氧化酶如血红素加氧酶-1（HO-1）、醌氧化还原酶1（NQO1）和谷胱甘肽S-转移酶（GST）的表达。这一机制增强了细胞的抗氧化防御能力，是对其直接自由基清除活性的重要补充。

NF-κB通路：金银花双黄酮通过抑制IκB激酶（IKK）活性，阻止IκBα的磷酸化和降解，从而抑制NF-κB的核转位和转录活性。NF-κB是炎症反应的核心转录因子，调控多种促炎基因（如iNOS、COX-2、TNF-α、IL-6）的表达。金银花双黄酮对NF-κB通路的抑制是其抗炎作用的另一重要机制。

MAPK通路：研究显示，金银花双黄酮能够抑制LPS诱导的p38 MAPK和JNK的磷酸化，而对ERK的磷酸化影响较小。MAPK通路的抑制进一步减少了炎症介质的产生，并与NF-κB通路形成交叉调控网络。

凋亡相关蛋白：在肝保护作用中，金银花双黄酮能够上调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达，下调促凋亡蛋白Bax的表达，抑制caspase-3的活化，从而减少肝细胞凋亡。这一效应与其抑制氧化应激和炎症反应密切相关。

多靶点作用网络

综合现有研究，金银花双黄酮的药理作用可概括为一个多靶点、多通路的复杂网络。其核心靶点是sPLA2-IIA，通过抑制该酶活性，阻断花生四烯酸级联反应；同时，该化合物还通过激活Nrf2通路增强抗氧化防御，抑制NF-κB和MAPK通路减少炎症因子产生，调节凋亡相关蛋白维持细胞存活。这种多靶点作用模式使得金银花双黄酮在治疗复杂疾病（如炎症性肝病）时可能具有优于单靶点药物的疗效和安全性。

成药性评价与药代动力学

类药性分析

基于Lipinski“五规则”和Veber规则，对金银花双黄酮的类药性进行评价：

从上述数据可以看出，金银花双黄酮的分子量和TPSA超出了推荐范围，这提示其口服生物利用度可能较低。事实上，该化合物的水溶性极差（0.0003 mg/mL），属于BCS IV类药物（低溶解度、低渗透性），这是其成药性面临的主要挑战。

药代动力学特征

目前关于金银花双黄酮药代动力学的系统研究尚不充分，但已有的一些初步数据提供了重要参考：

吸收：由于水溶性极差，金银花双黄酮的口服吸收较差。大鼠口服给药后，绝对生物利用度估计低于5%。腹腔注射或静脉给药可能是更有效的给药途径。制剂技术如纳米乳、脂质体、环糊精包合物等有望改善其口服吸收。

分布：静脉注射后，金银花双黄酮在体内分布广泛，主要蓄积于肝脏、肺和肾脏。其血浆蛋白结合率较高（>95%），表观分布容积（Vd）较大，提示组织分布广泛。血脑屏障穿透性低，限制了其中枢神经系统应用。

代谢：金银花双黄酮主要经肝脏代谢，涉及葡萄糖醛酸化和硫酸化等II相代谢反应。CYP450酶介导的I相代谢（如去甲基化、羟基化）也参与其代谢过程。代谢产物可能保留部分生物活性，但活性通常低于母体化合物。

排泄：金银花双黄酮及其代谢产物主要通过胆汁排泄进入肠道，部分经粪便排出体外，尿液中排泄量较少。其半衰期（t1/2）约为4-8小时，需每日多次给药维持有效血药浓度。

安全性评价

初步安全性评价显示，金银花双黄酮具有较好的安全性特征：

• 急性毒性：小鼠口服给药的半数致死剂量（LD50）>2000 mg/kg，腹腔注射的LD50约为500 mg/kg，表明该化合物在治疗剂量范围内安全性较高。
• 遗传毒性：Ames试验结果为阴性（0.6），未发现致突变性；体外染色体畸变试验和微核试验也未显示遗传毒性。
• 心脏毒性：hERG抑制试验为阴性，提示引起QT间期延长的风险较低。
• 肝毒性：在治疗剂量下未观察到明显的肝毒性，反而具有肝保护作用。

然而，长期毒性研究和生殖毒性研究尚缺乏，这是该化合物进入临床前必须补充的数据。

临床应用前景与展望

潜在适应症

基于金银花双黄酮的药理活性特征，其潜在的临床应用方向主要包括：

1. 炎症性肝病：金银花双黄酮通过抑制sPLA2-IIA活性、抗氧化和抗凋亡等多重机制保护肝细胞，在非酒精性脂肪性肝炎（NASH）、药物性肝损伤、酒精性肝病等炎症性肝病中具有治疗潜力。特别是其针对sPLA2-IIA的靶向作用，为开发新型肝保护药物提供了新思路。

2. 急性炎症性疾病：在急性胰腺炎、急性肺损伤、脓毒症等以过度炎症反应为特征的疾病中，金银花双黄酮的广谱抗炎作用可能发挥治疗价值。其抑制sPLA2-IIA的机制与现有抗炎药物（如NSAIDs、糖皮质激素）不同，可能为这些疾病提供新的治疗选择。

3. 慢性炎症性疾病：类风湿性关节炎、炎症性肠病等慢性炎症性疾病也是潜在适应症。金银花双黄酮的多靶点作用模式可能有助于控制疾病进展，减少复发。

4. 肿瘤辅助治疗：尽管抗肿瘤活性相对较弱，但金银花双黄酮的抗炎和抗氧化特性使其可能作为肿瘤辅助治疗药物，减轻化疗引起的炎症反应和氧化应激损伤。

开发策略与挑战

将金银花双黄酮开发为临床药物面临的主要挑战包括：

1. 溶解度与生物利用度：极低的水溶性和口服生物利用度是最大的障碍。解决策略包括：（1）制剂技术：开发纳米乳、脂质体、固体分散体、磷脂复合物等新型给药系统；（2）前药设计：在酚羟基上引入磷酸酯、氨基酸酯等水溶性基团，在体内经酶解释放原药；（3）结构修饰：在保持活性的前提下引入极性基团或改变甲氧基位置，改善水溶性。

2. 来源与成本：天然来源含量低，化学合成难度大，导致金银花双黄酮获取成本高昂。解决策略包括：（1）生物合成：利用基因工程手段在微生物（如大肠杆菌、酵母）中重构双黄酮生物合成途径；（2）半合成：以廉价黄酮为原料，通过化学方法构建双黄酮骨架；（3）组织培养：优化植物细胞培养条件，提高目标产物产量。

3. 靶点选择性：尽管金银花双黄酮对sPLA2-IIA具有较好的选择性，但对其他磷脂酶家族成员的抑制作用仍需系统评估，以避免潜在的脱靶效应。

4. 临床转化：目前所有研究均处于临床前阶段，缺乏人体药代动力学和药效学数据。需要进行规范的临床试验，验证其安全性和有效性。

未来研究方向

未来金银花双黄酮的研究应重点关注以下方向：

1. 深入机制研究：利用结构生物学方法（如X射线晶体学、冷冻电镜）解析金银花双黄酮与sPLA2-IIA的复合物结构，为基于结构的药物设计提供精确模板。
2. 构效关系研究：系统合成金银花双黄酮的类似物和衍生物，探讨不同取代基对活性、选择性和药代性质的影响，寻找更优的候选化合物。
3. 组合药物研究：探索金银花双黄酮与现有药物（如甘草酸、水飞蓟素）的协同作用，开发复方制剂。
4. 疾病模型验证：在更接近临床的疾病模型（如高脂饮食诱导的NASH模型、胶原诱导的关节炎模型）中验证其治疗效果。
5. 绿色合成工艺：开发高效、环保的化学合成或生物合成方法，解决原料供应问题。

结语

金银花双黄酮作为天然双黄酮类化合物的杰出代表，以其独特的化学结构、明确的分子靶点和多效药理活性，在天然产物药物开发领域展现出重要的研究价值。该化合物通过抑制sPLA2-IIA活性、调节Nrf2/ARE和NF-κB信号通路，发挥抗炎、肝保护和抗氧化作用，在炎症性肝病和急性炎症性疾病的治疗中具有潜在应用前景。

然而，从天然产物到临床药物的转化之路充满挑战。金银花双黄酮极低的水溶性和口服生物利用度是其成药性的主要瓶颈，需要通过制剂技术、前药设计或结构修饰加以突破。同时，其来源受限、临床前数据不完整等问题也需要系统解决。

展望未来，随着结构生物学、计算化学和生物合成技术的进步，金银花双黄酮及其衍生物有望克服当前障碍，成为治疗炎症相关疾病的新型药物候选物。这一天然产物的研究历程再次证明，大自然仍然是药物发现最丰富的源泉，而现代科学技术则为挖掘这一宝藏提供了强大的工具。对金银花双黄酮的深入研究，不仅有助于开发新的治疗药物，也将为理解双黄酮类化合物的构效关系和药理机制提供宝贵知识。