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中国药典中药材品种

2018-03-20枸杞子

一、枸杞子药典标准
枸杞子
Gouqizi
LYCII FRUCTUS

本品为茄科植物宁夏枸杞 Lycium barbarum L. 的干燥成熟果实。夏、秋二季果实呈红色时采收,热风烘干,除去果梗,或晾至皮皱后,晒干,除去果梗。
【性状】 本品呈类纺锤形或椭圆形,长6~20mm,直径3~10mm。表面红色或暗红色,顶端有小突起状的花柱痕,基部有白色的果梗痕。果皮柔韧,皱缩;果肉肉质,柔润。种子20~50粒,类肾形,扁而翘,长1.5~1.9mm,宽1~1.7mm,表面浅黄色或棕黄色。气微,味甜。
【鉴别】 (1)本品粉末黄橙色或红棕色。外果皮表皮细胞表面观呈类多角形或长多角形,垂周壁平直或细波状弯曲,外平周壁表面有平行的角质条纹。中果皮薄壁细胞呈类多角形,壁薄,胞腔内含橙红色或红棕色球形颗粒。种皮石细胞表面观不规则多角形,壁厚,波状弯曲,层纹清晰。
(2)取本品0.5g,加水35ml,加热煮沸15分钟,放冷,滤过,滤液用乙酸乙酯15ml振摇提取,分取乙酸乙酯液,浓缩至1ml,作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材0.5g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-三氯甲烷-甲酸(3:2:1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
【检查】 水分 不得过13.0%(通则0832第二法,温度为80℃)。
总灰分 不得过5.0%(通则2302)。
重金属及有害元素 照铅、镉、砷、汞、铜测定法(通则2321原子吸收分光光度法或电感耦合等离子体质谱法)测定,铅不得过5mg/kg;镉不得过0.3mg/kg;砷不得过2mg/kg;汞不得过0.2mg/kg;铜不得过20mg/kg。
【浸出物】 照水溶性浸出物测定法(通则2201)项下的热浸法测定,不得少于55.0%。
【含量测定】 枸杞多糖 对照品溶液的制备取无水葡萄糖对照品25mg,精密称定,置250ml量瓶中,加水适量溶解,稀释至刻度,摇匀,即得(每1ml中含无水葡萄糖0.1mg)。
标准曲线的制备 精密量取对照品溶液0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml,分别置具塞试管中,分别加水补至2.0ml,各精密加入5%苯酚溶液1ml,摇匀,迅速精密加入硫酸5ml,摇匀,放置10分钟,置40℃水浴中保温15分钟,取出,迅速冷却至室温,以相应的试剂为空白,照紫外-可见分光光度法(通则0401),在490nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
测定法 取本品粗粉约0.5g,精密称定,加乙醚100ml,加热回流1小时,静置,放冷,小心弃去乙醚液,残渣置水浴上挥尽乙醚。加入80%乙醇100ml,加热回流1小时,趁热滤过,滤渣与滤器用热80%乙醇30ml分次洗涤,滤渣连同滤纸置烧瓶中,加水150ml,加热回流2小时。趁热滤过,用少量热水洗涤滤器,合并滤液与洗液,放冷,移至250ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml,置具塞试管中,加水1.0ml,照标准曲线的制备项下的方法,自“各精密加入5%苯酚溶液1ml”起,依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中含葡萄糖的重量(mg),计算,即得。
本品按干燥品计算,含枸杞多糖以葡萄糖(C6H12O6)计,不得少于1.8%。
甜菜碱 取本品剪碎,取约2g,精密称定,加80%甲醇50ml,加热回流1小时,放冷,滤过,用80%甲醇30ml分次洗涤残渣和滤器,合并洗液与滤液,浓缩至10ml,用盐酸调节pH值至1,加入活性炭1g,加热煮沸,放冷,滤过,用水15ml分次洗涤,合并洗液与滤液,加入新配制的2.5%硫氰酸铬铵溶液20ml,搅匀,10℃以下放置3小时。用G4垂熔漏斗滤过,沉淀用少量冰水洗涤,抽干,残渣加丙酮溶解,转移至5ml量瓶中,加丙酮至刻度,摇匀,作为供试品溶液。另取甜菜碱对照品适量,精密称定,加盐酸甲醇溶液(0.5→100)制成每1ml含4mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验,精密吸取供试品溶液5μl、对照品溶液3μl与6μl,分別交叉点于同一硅胶G薄层板上,以丙酮-无水乙醇-盐酸(10:6:1)为展开剂,预饱和30分钟,展开,取出,挥干溶剂,立即喷以新配制的改良碘化铋钾试液,放置1~3小时至斑点清晰,照薄层色谱法(通则0502)进行扫描,波长:λS=515nm,λR=590nm,测量供试品吸光度积分值与对照品吸光度积分值,计算,即得。
本品按干燥品计算,含甜菜碱(C5H11NO2)不得少于0.30%。
【性味与归经】 甘,平。归肝、肾经。
【功能与主治】 滋补肝肾,益精明目。用于虚劳精亏,腰膝酸痛,眩晕耳鸣,阳萎遗精,内热消渴,血虚萎黄,目昏不明。
【用法与用置】 6~12g。
【贮藏】 置阴凉干燥处,防闷热,防潮,防蛀。

二、枸杞子化学成分

宁夏枸杞的成熟果实含甜菜碱(betane),阿托品(aTCMLIBopine),天仙子胺(gyoscyamine)。又含玉蜀黍黄质,酸浆果红素,隐黄质(cryptosxanthin),东莨菪亭Beta-胡萝卜素,α-胡萝卜素,硫胺素,核黄素,烟酸,维生素C。种子含氨基酸:L-天门冬氨酸L-脯氨酸L-丙氨酸L-亮氨酸L-苯丙氨酸L-丝氨酸甘氨酸,谷氨酸,半胱氨酸,L-赖氨酸L-精氨酸L-异亮氨酸L-苏氨酸L-组氨酸,酷氨酸,L-色氨酸L-蛋氨酸。还含钾、钙、钠、锌、铁、铜、铬、锶、铅、镍、镉、钴、镁等元素。另含具促进免疫作用的多糖,含量为7.09%。又含牛磺酸,γ-氨基丁酸。
同属植物枸杞的成熟果实含甜菜碱,玉蜀黍黄质,酸浆果红素(physalien),还含氨基酸:L-亮氨酸L-缬氨酸L-脯氨酸L-丙氨酸L-酪氨酸L-谷氨酰胺甘氨酸,谷氨酸,L-天门冬氨酸L-天冬酰胺L-组氨酸L-色氨酸。又含挥发性成分,主要是藏红花醛(safranal),β-紫罗兰酮(β-,3-羟基-β-紫罗兰酮(3-hydroxy-β-ionone),左旋1,2-去氢-α-香附子烯(1,2-dehydrox-α-cyperene),马铃薯螺二烯酮(solavetivone)。另报道,100g果实含胡萝卜素3.39mg,硫胺素0.23mg,核黄素0.33mg,烟酸1.7mg,维生素C3.0mg。种子含油,其中非皂化部分含有多种甾醇:属4-去甲基甾醇类的有胆甾醇,7-胆甾烯醇,菜油甾醇,24-亚甲基胆甾醇,异岩藻甾醇,豆甾醇β-谷甾醇,24-lhnhad -5,24-胆甾二烯醇,24-乙基-胆甾二烯醇,胆甾烷醇,24-甲基胆甾烷醇,24-乙基-22-胆甾烯醇;属4-甲基甾醇类的有31-去甲基环木菠萝烷醇,31-去甲基环木菠萝烯醇,环桉烯醇,31-去甲基-8-羊毛甾烯醇,4α,14α,24-三甲基-8,24-胆甾二烯醇,31-去甲基-9(11)-羊毛甾烯醇,4α-甲基,-8-胆甾烯醇,4-甲基-7-胆甾烯醇,4-甲基-24乙基-7-胆甾烯醇,4,24-二甲基-胆甾烯醇,禾本甾醇,柠檬甾二烯醇,4α,24-甲基7,24-胆甾二烯醇,4α-甲基乙基-7,24-胆甾二烯醇);4,4-二甲基甾醇类的有8-羊毛甾烯醇,环木菠菜萝烷醇,环木菠萝烯醇,羊毛甾醇,β-香树脂醇,羽扇豆醇,24-亚甲基-8-羊毛甾烯醇,24-亚甲基环木菠菜萝烷醇等。另含具促进免疫作用的多糖,含量5.42%-8.23%[6]。又含牛磺酸(taurine),γ-氨基丁酸(γ-aminobutanoic acid).

三、枸杞子药理作用

1.对免疫功能的影响:

1.1.枸杞子多糖对3H一TdR掺入小鼠脾淋巴细胞及Ts细胞的影响:
1.1.1.对3H一TdR掺人脾淋巴细胞的影响: 枸杞多糖(LBP)5mg/kg和10mg/(kg.天)×7天,腹腔注射可明显提高ConA诱导作用下3H一TdR掺入脾T细胞值,10mg/kg可使掺入指数达到高峰,比对照组高3倍。而LBP25mg/kg和50mg/kg对脾T细胞转化反应有明显抑制作用。表明LBP对脾T淋巴细胞增殖效应与剂量有密切关系。以LBP提高脾T淋巴细胞转化值最显着剂量10mg/(kg.天)×7天, 观察对B 淋巴细胞有丝分裂剂LPS诱导3H一TdR掺入细胞作用的影响。在LPS浓度为50.70和100μg/ml时,LBP对3H一TdR掺入B细胞指数无明显影响,表明LBP对B细胞有丝分裂剂诱导的细胞转化功能不敏感。

1.1.2.对脾抗体形成细胞数的作用: LBP在5.20mg/(kg.天)×7天可显着增高脾PFC数,5mg/kg剂量可使PFC数达正常免疫对照组的1.4倍。而25.50mg/kg时,则见PFC数明显降低,其中25mg/kg组PFC数为正常对照组的43%。表明LBP对抗体形成细胞数的增强效果有适宜的剂量范围。

1.1.3.对脾Ts细胞功能的影响: 采用超适量SRBC免疫(SOI)诱导Ts细胞法观察到,供体小鼠脾细胞中Ts细胞可使正常免疫小鼠的PFC数抑制63%,表明SOI法可以诱导出对抗体生成细胞产生显着抑制作用的Ts细胞。给予供体鼠LBP5mg/(kg.天)×7天后,受体鼠PFC数比SOI对照组显着下降,说明此剂量对Ts细胞功能有增强作用。当剂量增加到25、50mg/kg时,LBP对Ts细胞功能的增强作用明显下降。

1.2.枸杞子多糖对S180荷瘤小鼠细胞免疫功能的影响及其抑瘤作用:1.2.1.枸杞子多糖对正常小鼠细胞免疫功能的影响: 小鼠腹腔注射LBP5mg/(kg.天),连续7天(do-6),于第7天取脾脏测T淋巴细胞增殖反应。结果表明LBP可明显提高正常小鼠经ConA诱导的脾脏T淋巴细胞增殖反应,其cpm值由对照组的28410±3110提高到给药组的64870±2571。

1.2.2.枸杞子多糖对S180荷瘤小鼠细胞免疫功能的影响及其抑瘤作用:小鼠皮下接种S180肿瘤细胞后2天,腹腔注射LBP10mg或20mg/(kg.天)×7天,于第9天处死小鼠,测瘤重及脾脏T淋巴细胞增殖反应。结果表明LBP10mg和20mg/kg的抑瘤率分别为31%,39%。同时可见LBP10mg组小鼠的T淋巴细胞增殖反应cpm值由未给药组的139±62提高到给药组的5581±783,RPI(Relative roliferationinde×,相对增殖指数)从相当于正常的0.3%提高到24.6%。实验用环磷酰胺(Cy)做阳性对照,1次皮下注射25mg/kg,抑瘤率为47%,T淋巴细胞增殖反应 CMP值为165±31。

1.2.3.枸杞子多糖对受环磷酰胺抑制的正常小鼠细胞免疫功能的影响:小鼠在皮下注射Cy25mg/kg同一天开始腹腔注射LBP5mg/(kg.天)×7天, 于第7天取脾脏测T细胞增殖反应。结果加LBP后RPI为105%(单独用Cy组小鼠的RPI为正常的33%),表明LBP完全对抗了Cy所造成的细胞免疫功能低下的作用。

1.2.4.枸杞子多糖与环磷酰胺合用的抑瘤作用: 小鼠皮下接种S180 细胞后2天皮下注射 Cy25mg/kg,抑瘤率为31%,同时腹腔注射LBP 10m/(kg.天)×7天, 则抑瘤率提高到47%,但无显着差异(P>0.05)。当Cy皮下注射l2.5mg/kg时抑瘤率为14%,其瘤重与肿瘤对照组相比无显着差异,如同时合用LBP10mg/(kg.天)×7天,腹腔注射则抑瘤率增至54%,(P<0.01),表明LBP可增强Cy的抑瘤作用。

1.3.枸杞子多糖及合并应用厌氧短棒杆菌菌苗对小鼠腹腔巨噬细胞抑制肿瘤增殖活性的影响: 枸杞子多糖给于正常小鼠腹腔注射40mg/(kg.天)×7天 能增强经ConA处理的巨噬细胞抑制肿瘤靶细胞增殖的活性;LBP5、10、20、40mg/(kg.天)×7天并与小剂量(250ug/只)厌氧短棒杆菌菌苗(CorynebacteriumParvum,CP)合并应用,具有明显的协同效应。在LBP浓度为20mg/kg时,效应最为显着,对靶细胞P815及P388增殖的抑制率分别为85.5%和63.6%;CP对照组则为28.1%及24.O%。表明合并应用LBP及CP可减少二者的用量,增强效应,减低CP的毒副作用。LBP主要作用于T细胞的免疫增强剂,能增强CTL,NK细胞的功能;CP则为巨噬细胞刺激剂。实验表明,合并应用作用于免疫应答不同环节的免疫增强剂可获得协同效应。实验还表明,LBP无论对巨噬细胞在非特异性抗肿瘤或特异性抗肿瘤过程中均具有激活作用。

1.4.枸杞子多糖对小鼠白细胞介素-2 活性的增强作用: 在诱导小鼠脾细胞白细胞介素-2(IL-2)的培养液(脾细胞5×l0/ml和ConA4ug/ml)中加入LBP,所制备的含IL-2上清液使成年小鼠胸腺细胞在体外增殖活性([3H]TdR参入法)升高。老年小鼠IL-2促进淋巴细胞增殖水平显着低于成年。LBP可使老年小鼠IL-2的这种作用显着提高,达到成年小鼠水平。实验表明LBP对IL-2的活性有增强作用并使老年小鼠IL-2活性得到恢复。

1.5.枸杞子多糖对老年小鼠免疫功能低下的调节作用: 老年小鼠脾溶血空斑形成细胞(PFC)数明显低于正常成年小鼠水平,下降51%。给于LBP20mg/(kg.天),腹腔注射,7天,可明显提高老年小鼠脾PFC值到正常成年水平。老年小鼠对ConA 诱导下3H一TdR掺入胸腺细胞值也明显降低。给于LBP后掺入值显着提高,在给予LBP 5mg/kg 时可使3H一TdR掺入胸腺细胞值也明显降低。给于LBP后掺入值显着提高,在给予LBP 5mg/kg时可使3H一TdR掺入值提高大约10倍。应用超适剂量SRBC免疫法(SOI)表明,适宜剂量的LBP对老年小鼠抑制性T细胞(Ts)有明显调节作用,增强Ts细胞的活性。

1.6.枸杞子多糖对小鼠T、杀伤T和NK细胞的免疫药理作用及对抗环磷酰胺的免疫抑制作用: LBP5-10mg/kg,腹腔注射,可以提高小鼠脾脏T淋巴细胞的增殖功能,增强CTL(Cy-totoxic T lymphocyte)的杀伤功能,特异杀伤率由33%提高到67%。LBP5mg/kg,腹腔注射,可以增强NK细胞的杀伤功能,杀伤率由12.4%提高到18%。LBP5-10mg/kg可以对抗环磷酰胺(Cy)对小鼠T、CTL和NK细胞的免疫抑制作用;其中T淋巴细胞的相对增殖指数(RPI)由33%提高至105%,Cy对CTL 的抑制率由单用的51%降低到与LBP合用的19%和36%,NK细胞的杀伤率亦由Cy单用的9.5%提高到15%和16%。这些结果表明LBP增强了正常小鼠和Cy处理小鼠的T细胞介导的免疫反应与NK细胞的活性。
此外,枸杞多糖还能显着增加巨噬细胞C3b和Fc受体的数量和活力,并能减轻醋酸可的松对其的抑制作用。给大鼠灌胃枸杞袋泡茶2ml/只/天,持续2周,可明显提高免疫球蛋白含量(尤其是IgM)和补体活性。

2.降血糖作用:枸杞子浸膏6g/kg,腹腔注射,可使兔血糖2-3小时内降低13%左右,以后逐渐恢复。有人认为其降血糖作用乃由于其中含有胍的衍生物。

3.抗脂肪肝作用:大鼠长期(75天)口服果实中的甜菜碱,可升高血及肝中的磷脂水平;事先或同时服用甜菜碱可对抗四氯化碳引起的大鼠肝中磷脂、总胆固醇含量的减低,并有所提高;对BSP、SGP-T、碱性磷酸脂酶、胆碱酯酶等均有改善作用。主要是甜菜碱在体内起甲基供应体的作用。

4.对血压的作用:果实水溶性提取物20mg/kg静脉注射 可使麻醉兔血压降低,呼吸兴奋;注射阿托品切断两侧迷走神经可以消除其降压作用;对离体兔心呈抑制作用,并使兔耳血管收缩,甲醇、丙酮等有机溶剂提取物也有轻微降压作用。

5.枸杞子提取液能促进干乳酪酸杆菌和嗜酸乳酸杆菌的生长和产气量。

6.枸杞子煎剂对小鼠羟脯氨酸含量和耐缺氧和抗疲劳作用的影响:羟脯氨酸(Hydroxyproline)是胶原纤维与蛋白质中的一种氨基酸,是脯氨酸羟化而来。人体在衰老过程中,由于氧供应不足,影响脯氨酸的羟化过程,因而造成老年人的胶原中羟脯氨酸含量低下,主要脏器缩小变形,重量减轻。由于肺功能受影响,肺活量下降,储备能力减少,抵抗力减退,肌力下降,耐缺氧、抗疲劳能力下降。因此羟脯氨酸含量与衰老有关。枸杞子煎剂(13.23%浓度)给予小鼠 灌胃0.3ml/20g,每天1次,30天 后羟脯氨酸浓度与对照比较增加率达15.49%。枸杞子煎剂给予小鼠 腹腔注射 0.3ml/20g其耐缺氧能力与对照组生存时间27.9±1.3分钟相比较,枸杞为37.5±2.5分钟(P<0.01)。抗疲劳实验与对照比较亦有非常显着的差异(P<0.01)。

7.抗肿瘤作用:体外试验表明,枸杞子、叶对人胃腺癌KATo-Ⅲ细胞,枸杞果柄、叶对人宫颈癌Hela细胞均有明显抑制作用,其作用机理主要表现在抑制细胞DNA合成,干扰细胞分裂,细胞再殖能力下降。枸杞子冻干粉混悬液和环磷酰胺联合用药,治疗大鼠Walker癌肉瘤256,发现其对环磷酰胺导致的白细胞减少有明显保护作用。

8.其它作用:饲料中加入甜菜碱(4-6g/kg或8g/kg),可增加雌、雄雏鸡的体重,增加产蛋量。小鼠 灌胃 参杞膏1:10 的稀释液(0.2ml/天)14天,可使体重明显增加,超过对照组1倍,且动物毛色光泽,肌肉丰满,血色鲜红。此外,枸杞子和甜菜碱对CCl4引起的肝损害有保护作用。
 
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