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中国药典中药材品种

2017-10-31冬虫夏草

冬虫夏草
一、冬虫夏草药典标准
冬虫夏草
Dongchongxiacao
CORDYCEPS
    本品为麦角菌科真菌冬虫夏草菌Cordyceps sinensis(BerK.)Sacc.寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座和幼虫尸体的干燥复合体。夏初子座出土、孢子未发散时挖取,晒至六七成干,除去似纤维状的附着物及杂质,晒干或低温干燥。
    【性状】本品由虫体与从虫头部长出的真菌子座相连而成。虫体似蚕,长3~5cm,直径0.3~O.8cm;表面深黄色至黄棕色,有环纹20~30个,近头部的环纹较细;头部红棕色;足8对,中部4对较明显;质脆,易折断,断面略平坦,淡黄白色。子座细长圆柱形,长4~7cm,直径约0.3cm;表面深棕色至棕褐色,有细纵皱纹,上部稍膨大;质柔韧,断面类白色。气微腥,味微苦。
    【含量测定】照高效液相色谱法(通则0512)测定。
    色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以磷酸盐缓冲液(pH6.5)[取0.01mol/L磷酸二氢钠68.5ml与0.01mol/L磷酸氢二钠31.5ml,混合(pH6.5)]-甲醇(85:15)为流动相;检测波长为260nm。理论板数按腺苷峰计算应不低于2000。
    对照品溶液的制备  取腺苷对照品适量,精密称定,加90%甲醇制成每1ml含20µg的溶液,即得。
    供试品溶液的制备  取本品粉末(过三号筛)约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入90%甲醇10ml,密塞,摇匀,称定重量,加热回流30分钟,放冷,再称定重量,用90%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
    测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10µl,注入液相色谱仪,测定,即得。
    本品含腺苷(C10H13N5O4)不得少于0.010%。
    【性味与归经】甘,平。归肺、肾经。
    【功能与主治】补肾益肺,止血化痰。用于肾虚精亏,阳痿遗精,腰膝酸痛,久咳虚喘,劳嗽咯血。
    【用法与用量】3~9g。
    【贮藏】置阴凉干燥处,防蛀。


二、冬虫夏草化学成分
冬虫夏草含粗蛋白25.32%,其水解所得的氨基酸有L-天门冬氨酸(L-Asparagine),谷氨酸(glutamic acid),L-丝氨酸(L-serine),L-组氨酸(L-histidine),甘氨酸(glucine),L-苏氨酸(L-threonine),L-精氨酸(L-arginine),L-酪氨酸(L-tyrosine),L-丙氨酸(L-alanine),L-色氨酸(L-TCMLIByptophane),L-蛋氨酸(L-methboine),L-缬氨酸(L-valine),L-苯丙氨酸(L-phenylalanine),L-异亮氨酸(L-isoleucine),L-亮氨酸(L-leucine),L-鸟氨酸(L-ornithine),L-赖氨酸(L-lysine)。还含脂肪8.4%,其中含饱和脂肪酸(硬脂酸)13.0%,不饱和脂肪酸(油酸占31.69%,β-亚油酸占68.13%)82.2%。又含虫草酸(cordycepic acid)即是D-甘露醇(D-mannitol),维生素A、C、B12,烟酸(nicotinic acid),烟酚胺(nicotinic amide),麦角甾醇(ergosterol),尿嘧啶(uracil),腺嘌呤(adenine),腺嘌呤核苷(adenine nucleoside),麦角甾醇过氧化物(ergosterol peroxide),胆甾醇软脂酸酯(cholesteryl palmitate)及水溶性多糖即半乳甘露聚糖(galactomannan)系由D-半乳糖(D-galactose)与D-甘露糖(D-mannose)各1mol所组成。还含多种微量元素,以磷的含量最高,其次是钠、钾、钙、镁、铝、锰、铁、铜、锌、硼、镍等。预试还含生物碱。近从子座部分除分得大量氨基酸和甘露醇外,还分得次黄嘌呤核甙(hypoxantine nucleoside),胸腺嘧啶(thymine),尿嘧啶,及含有少量鸟嘌呤(guanine)的次黄嘌呤(hypoxanthine)混合物;从虫体除分得大量氨基酸和甘露 醇外,还分得次黄嘌呤,鸟嘌呤,腺嘌呤和腺苷(adenosine)。

三、冬虫夏草药理作用
1.免疫药理作用:1.1.对免疫器官的影响:虫草、虫草菌浸剂可明显增加小鼠脾重并拮抗强松龙与环磷酰胺引起的脾重减轻,其机制可能是通过促进脾脏DNA的生物合成,增加核酸与蛋白质含量,促使脾细胞增殖。拮抗皮质激素与环磷酰胺引起的脾萎缩是通过虫草多糖增加脾脏营养性血流量的作用实现的。虫草与虫草菌浸剂还可使小鼠胸腺缩小,并加重强的松龙与环磷酰胺引起的胸腺萎缩作用,但它们所致的胸腺萎缩作用是可复性的,组织化学分析仅见萎缩胸腺的髓质细胞稍增大、质疏松,有核分裂现象,而未发现组织萎缩、细胞破坏等抑制现象,因而虫草致胸腺缩小可能与趋赶和释放作用有关,在摘除双侧肾上腺的小鼠,虫草诱使胸腺萎缩的作用消失,说明该作用是通过肾上腺皮质实现的。引起胸腺缩小的成分既存在于虫草的虫体,也存在于子座部分。此外,使用虫草、虫草菌的小鼠肝脏会轻度肿大。这主要是通过增大肝ffer氏细胞体积实现的,而对肝细胞内的DNA、RNA及蛋白质合成均无明显的影响。
1.2.对单核一巨噬细胞系统功能的增强作用:组织学检查与免疫组织化学分析表明,使用虫草或虫草菌制剂的小鼠,腹腔粘附细胞、脾巨噬细胞、肝Kupffer氏细胞体积增大、胞浆增多、核质疏松、细胞内酸性磷酸酶活性增强,呈激发状态。虫草的脂质体制剂对胞壁二酰肽(MDP)具有强烈的激活作用。由于脂质体的主要成分是类脂,与细胞膜的脂质成分相似,因此极易为巨噬细胞膜所接受,脂质体在体内停留时间较单纯虫草长可使激活维持时间延长。碳粒廓清试验表明虫草及其制剂能明显增大小鼠血碳清除率和肝、脾吞噬系数。体内吞噬试验,证明虫草与虫草菌能显着提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬指数与吞噬百分率,并能对抗可的松引起的膜腔巨噬细胞吞噬功能的降低。它们还能增加单核细胞、巨噬细胞表面Fc受体数目,从而增强其对抗原信息的识别、处理、传递的能力和通过Fc受体实现的对靶细胞的ADCC效应。此外,虫草还能通过刺激小鼠腹腔粘附细胞分泌高滴度的IL,参与调节免疫反应。虫草与虫草菌激活单核巨噬细胞系统的机制还不清楚,可能是直接激活本系统,也可能通过包括TLC和补体备解素系统在内的各种级联活化得以实现。
1.3.对体液免疫功能的增强作用:虫草在体外可直接刺激小鼠胸腺细胞增殖,刺激作用与剂量相关,最适剂量为10mg/kg。与ConA对胸腺细胞的刺激作用相比,虫草的作用不强,刺激指数仅是ConA的1/56。虫草刺激脾细胞增殖反应与剂量有关,8mg/ml为最适剂量,但其作用明显低于ConA的作用。小鼠脾细胞经抗Thy-l血清和补体处理,以3H一TdR掺入法证实T淋巴细胞已全部破坏,但经处理的细胞经虫草刺激仍有增殖反应,刺激指数为18.6,说明虫草有直接刺激脾脏Thy-l细胞,即B淋巴细胞增殖作用。使用虫草菌或虫草多糖的小鼠,其血清IgG含量明显增加。给小鼠服用虫草菌制剂,检测以鸡血球兔疫后血清溶血素的含量,结果虫草菌组比对照组的半数溶血值(HC50)显着增大(P<0.01),虫草菌丝粉0.3ml,ig小鼠,连续7天,其HC50较对照组提高55.16%P<0.001,说明虫草菌及其制剂能提高小鼠血清溶血素(IgM)水平。虫草(8mg/ml)与脾细胞共育48小时,经处理后能部份吸收除去上清液中IL2,吸收百分率与ConA活化的脾细胞的IL2吸收百分率相近,提示虫草可诱导脾细胞表达IL2受体,诱导表达的IL2受体数量与ConA诱导的数量相近。
1.4.对细胞免疫功能的调节作用:虫草或虫草菌能抑制机体细胞免疫功能。用3H一IdR掺入法进行的体外实验及体内实验均证实,虫草、虫草菌(拟青霉)制剂能显着抑制小鼠脾细胞对ConA刺激产生的淋巴细胞转化。它们还能十分显着抑制(P<0.01=二硝基氯苯(DNCB)所致的小鼠迟发性超敏反应。虫草菌粉0.6-5mg/ml均能显着抑制小鼠外周白细胞吞噬功能、脾淋巴细胞增殖反应,混合淋巴细胞培养以及LPS诱导的巨噬细胞IL一1生成(P<0.05-0.01=。其抑制强度与虫草菌粉剂量成正比例。5mg/ml虫草菌粉可完全抑制上述细胞免疫反应,而该剂量药物与脾细胞共育5天也不影响细胞的存活率。给同种异体皮肤移植小鼠每日po虫草菌粉4g/kg,使皮片存活时间(12.7±2.2天)较对照组(8.3±0.7天)显着延长(P<0.01=,近似于环孢霉素A(每日5mg/kg,po)抑制皮片排异的效果(13±2.9天,P>0.7)。虫草菌能显着减少人外周血T淋巴细胞的活性E花结(Ea)形成率,延长小鼠同种移植心脏的存活期。采用3H一TdR掺入法对小鼠T淋巴细胞亚群的研究结果表明,虫草菌在体外能显着增强ConA诱导的小鼠抑制性T淋巴细胞(Ts)功能,在体内显着增强自发性抑制性T淋巴细胞(STs)功能,提示它是选择性地作用于Ts细胞亚群而发挥对细胞免疫功能的调节作用。但虫草与虫草菌对机体细胞免疫功能调节作用的研究结果并不一致,可能与药物处理、动物选择及实验方法等有关。因此有的报道虫草或虫草菌对机体细胞免疫功能起增强作用。虫草水提液对小鼠胸腺细胞有与剂量相关的致有丝分裂作用,说明它能直接刺激T淋巴细胞增殖,但作用不强。服用虫草的家兔((2g/(kg·天),连服7天),按PHA淋转试验3H一TdR掺入法测定。结果表明虫草有促进T淋巴细胞转化作用。虫草醇提物能提高小鼠淋巴细胞E花结形成率,并拮抗强的松龙及环磷酰胺引起的E花结率的减少。
1.5.对自然杀伤细胞(NK)活性的增强作用:采用125I释放法检测小鼠和人的体外NK活性,用125I清除法检测小鼠体内NK活性的方法,以虫草醇提液体内给药能明显增强小鼠体内、外NK对Yac-1细胞的杀伤活性,并保护环磷酰胺所致免疫抑制小鼠NK活性的降低;虫草醇提液0.1、1.0mg/ml体外处理人外周血单核细胞,可使NK杀伤K562细胞的活性呈时间依赖性增强。
2.对中枢神经系统的作用:2.1.对小鼠自发活动的影响:采用活动直接描记法,ip虫草浸液相当生药量5g/kg,对照组用生理盐水,以SJ-Ⅲ型生理记录仪描记给药前和给药后30分钟后小鼠自发活动的曲线。结果表明虫草组能明显减少小鼠的自发活动。
2.2.对戊巴比妥钠引起的小鼠睡眠时间的影响:小鼠按上述剂量ig,每天1次,连续4天,对照组给等容积生理盐水。末次给药后l小时ip戊巴比妥钠40mg/kg,以翻正反射消失为睡眠指标,记录各组睡眠时间。虫草组为31.68±12.88分钟(n=19,P<0.05),生理盐水组为23.60±9.44(n=20)。人工发酵培养的冬虫夏草菌丝体提取物(代号CsB),能增加小鼠ip氯丙嗪的镇静作用和拮抗苯丙胺的兴奋作用。作用强度与剂量有关,5g/kg即可使小鼠活动减少一半。小鼠ipCsB10-20g/kg,可明显延长戊巴比妥钠的睡眠时间,与对照组比较P值分别为<0.05和P<0.01。
2.3.抗惊厥作用:小鼠分别sc不同剂量的人工发酵培养的冬虫夏草菌丝体提取物(代号CsB),给药后40分钟每鼠iv烟碱1.1mg/kg,结果对照组10/10动物出现强直痉挛随后死亡,给CsB的5、10、20g/kg剂量组的死亡率分别为5/10,2/10和0/9,均显着低于对照组。
2.4.对毛果芸香碱引起流涎的影响:小鼠scCsB10,20g/kg或生理盐水。40分钟后iv毛果芸香碱5mg/kg,3分钟后,用滤纸拭去嘴边的唾液,以唾液湿润部位的滤纸剪下,干燥后称量,比较唾液分泌量,结果对照组的纸片平均重20.9±2.0mg,CsB10g/kg组为13.5±2.1mg(P<0.05),20g/kg组为11.1±2.4mg(P<0.01=。
2.5.对正常动物体温的影响:小鼠分别scCsB5,10及20g/kg,对照组注射生理盐水。Lh用半导体体温计测肛温。结果给药组肛温分别为36.89±0.28,35.99±0.26和34.85±0.31℃,均比对照组(37.98±0.13℃)显着降低(P<0.01)。按天然冬虫夏草所含的18种氨基酸成分进行人工配伍成不同配比与天然虫草浸液进行对照比较,人工配伍的氨基酸亦有类似的对中枢神经的作用。
3.对心血管系统的作用:3.1.对血压和心率的影响:麻醉家兔分别iv人工虫草菌丝体醇提液(简称Cs一4)和人工虫草发醇液浸膏(简称冬发)0.15和0.3g/kg,观察血压和心率的改变。结果表明Cs-4醇提物使家兔心率明显减慢(P<0.005)维持时间长达1小时以上;血压总趋势下降。0.3g/kg剂量在给药后5分钟内降压明显(P<0.01),但迅速恢复至原有水平。冬发可使心率略减慢,血压有下降趋势,但无统计学意义。麻醉犬iv虫草浸剂(1:1)0.5-1.0ml/kg时,就有明显的降压作用。在降压时使呼吸振幅加大与频率增加。但ip或im给于1:1浸剂2ml/kg时,对血压无影响。
3.2.对心肌缺血的影响:家兔iv人工虫草菌菌丝体醇提物0.3g/kg和人工虫草发酵液浸膏0.1g/kg和0.15g/kg以及等容积盐水或培养液作对照。5分钟后iv垂体后叶素1.5u/kg,记录心电图,以S-T段和T波改变作为观察指标。结果表明醇提物对心电图的影响与对照组比较无统计学的差异(P>0.05)。0.1g/kg浸膏组可明显对抗T波直立上升(P<0.05=和对抗3一T段升高。醇提物对大鼠应激性心肌醒塞亦有一定保护作用。醇提物和浸膏2.5和5.0g/kgip给于小鼠。10分钟后sc异丙肾上腺素300ug/kg,测定小鼠耗氧量及死亡时间。结果醇提物可明显延长缺氧小鼠的存活时间(P<0.001),提高耐缺氧能力。同时给药组小鼠耗氧量明显下降(P<0.05-0.001)。浸膏组亦能明显延长缺氧小鼠存活时间(P<0.001)和显着降低其耗氧量(P<0.001=,但低剂量组仅延长小鼠存活时间。
3.3.抗心律失常作用:人工虫草菌菌丝体醇提物0.5g/kg,能明显延长乌头碱诱发心律失常出现的时间和缩短心律失常持续的时间,且有统计学意义。对氯化钡诱发的心律失常作用,不能延长氯化钡诱发心律失常的时间,但可缩短心律失常维持的时间,与对照组比较具有显着性差异(P<0.02)。
3.4.对脂质代谢的影响:小鼠ig虫草粉(原生药粉)和人工发酵培养的青海虫草菌粉(菌丝粉)2.5g/kg,每日1次,连续10天。结果各组的小鼠血清胆固醇含量为;虫草组75.8±12.8(mg%);人工发酵培养的菌丝组为81.8±10.8(mg%),与对照组116.2±7.5(mg%)比较均有显着差异(P<0.05)。表明两者均有降低血清胆固醇的作用,人工发酵虫草菌丝体醇提物2.5g/kg剂量对小鼠有降低胆固醇和B-脂蛋白作用,与对照组比较P<0.01。虫草菌发酵液ig,可使正常大鼠血浆甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL一C)及极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL一C)显着降低,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL一C)及HDL一C/TC比值显着升高;于大剂量甲状腺素和去甲肾上腺素所致应激时大鼠的血脂升高也有显着的改善作用。
4.对血液系统的影响:4.1.促进造血功能:虫草具有显着的促生血作用,小鼠骨髓造血干细胞(CFU一S)脾结节形成试验表明,虫草的醇结晶制剂(含多种氨基酸、D一甘露糖和多糖)ip,可明显增高CFU一S产率和自杀率,表明该制剂可改变小鼠骨髓CFU一S的周期状态,促使它们从Go期进入S期,从而促进CFU一S增殖。
4.2.对血小板的影响:虫草及人工培养菌丝水提液im或ig分别为5g/kg和10g/kg,均可使小鼠脾系数增加,脾巨核细胞增殖,血中血小板数升高,电镜证实用药组小鼠所生成的血小板超微结构与正常小鼠超微结构一致,并还可见有颗粒增多,小管系统较为致密发达现象,初步证实了虫草制剂促使小鼠血小板生成是与促进脾巨核细胞增殖分化成熟密切相关,所生成的血小板不仅数量增加而且其超微结构与正常相同。聚家兔血小板血浆2.5ml,然后分别加入人工虫草菌菌丝体醇提物和发酵液10、5、2.5和10mg,以生理盐水或培养液作对照,3分钟后加入胶元溶液或ADP0.25ml,然后用721型分光光度计反复测定血小板血浆吸收度,并与正常血小板血浆作对照。结果两种制剂在5-10mg/ml剂量时有明显的抗血小板聚集作用(P<0.05-0.001=,低浓度1-2.5mg/ml则作用不明显。
5.对平滑肌的影响:本品浸剂对兔离体回肠呈抑制作用,并能显着增强肾上腺素的作用,但对豚鼠离体肠管抑制作用较弱,对未孕离体豚鼠子宫也呈抑制作用。另有报道虫草浸剂有明显扩张豚鼠离体气管平滑肌的作用。人工发酵冬虫夏草的原液与菌丝体3:1混合液,5.0g/kg给小鼠ig,对氨雾引咳有很强的镇咳作用,镇咳R值达150%。可显着地延长小鼠的咳嗽潜伏时和减少咳嗽次数,人工虫草原液5.0g/kg用量与生理盐水组比较,P<0.01,其作用强度接近可待因。3:1人工虫草混合液能明显增加大鼠气管内的分泌液量,给药后3小时内的分泌液量与生理盐水组比较P<0.01,其效果超过天然虫草和桔梗的作用。天然虫草浸剂能显着地扩张离体豚鼠支气管,而人工发酵虫草原液5×l0-3g/ml浓度,也可使组胺所致的离体豚鼠气管肌肉明显松弛,与生理盐水组比较P<0.01,但平喘效力仍不及氨茶碱,且对组胺和乙酰胆碱混合液诱发的整体豚鼠哮喘无明显的平喘作用,翻例潜伏时延长率仅为57.89%。
6.对核酸及蛋白质代谢的影响:虫草和人工培养虫草菌丝(简称菌丝)分别制成热浸剂,给小鼠sc0.2ml/只,每天1次,连续4天,虫草能使脾脏重量显着增加,同时能使3H一TdR、3H一UR、3H一Leucine掺入脾脏的DNA、RNA、蛋白质的量增加,对脾脏中的DNA含量无影响,RNA含量有增加,蛋白质含量有降低。对肝中DNA、RNA、蛋白质的掺入量及含量均无影响,对血清的蛋白质含量及掺入量亦无影响,菌丝有类似的作用。
7.抗炎作用:人工发酵虫草菌丝体的乙醇提取物给于小鼠sc5,10和20g/kg,同时每鼠左耳涂布0.2%巴豆油的乙醚乙醇溶液0.05ml。4小时按常规处理检查。结果用药组5,10,20g/kg)耳重差别为14.2±2.9,12.2±1.3和4.3±0.8mg/kg,显着低于对照组(21.1±1.9mg/kg)。唐荣江等的实验亦获得类似的结果。天然虫草sc2.5g/kg分别给于大鼠,给药后30分钟,于大鼠右后足踝关节处注射50%蛋清溶液0.1ml,定时观察肿胀度。结果两组均能降低蛋清诱发的大鼠足肿胀,P<0.01,但后者作用时间仅1小时左右。
8.抗菌作用:体外试验表明:冬虫夏草素对葡萄球菌、链球菌、鼻疽杆菌、炭疽杆菌、猪出血性败血症杆菌等均有抑制作用。本品煎剂对须疮癣菌、絮状表皮癣菌、石膏样小芽泡癣菌、羊毛状小芽胞癣菌等真菌均有抑制作用。
9.抗肿瘤作用:虫草水剂对小鼠S180有一定的抑瘤作用,sc5g/kg×3-4次时其抑制率为30-40%;ip5g/kg虽有43%抑制率,但出现毒性反应。虫草对ESC及其它瘤株(U14、Hep、Lewis、L7212、L7712、W256、吉田肉瘤)均未表现出抑制作用。虫草菌水剂对S180的作用比虫草弱,ip5g/kg×3时无抑瘤作用,当ip5g/kg×9-12次,观察3-4周,其抑瘤率为25%-67%。虫草菌对其它瘤株U14、P388、W256等也未表现出抗肿瘤作用。虫草水剂还能增强6-巯基嘌呤的抗肿瘤作用,而虫草菌水剂只能增强环磷酰胺的抗肿瘤作用,而不能增强6一巯基嘌呤的抗肿瘤作用。表明虫草水剂与虫草菌水剂的抗癌作用有所不同。实验还表明天然虫草及人工虫草菌丝水提物对小鼠皮下移植Lewis肺癌的生长均有明显的抑制作用,抑瘤率与对照组相比有显着差别(P<0.01),而天然虫草与人工虫草菌丝相比则无明显差异。
10.对呼吸系统的作用:虫草和虫草菌水提液有明显扩张支气管作用,但对组织胺引起的气管收缩无对抗作用。另有报道,低浓度虫草及虫草菌水提液有收缩离体豚鼠气管作用。也有祛痰平喘作用。
11.其它作用:11.1.雄激素样作用:虫草具有一定的雄激素样作用和抗雌激素样作用,对性功能紊乱有调节恢复作用。
11.2.延缓衰老作用:人工虫草对慢性肾衰患者血浆非必需氨基酸有所降低,必需氨基酸与非必需氨基酸的比值上升,可能与补充必需氨基酸,使氮利用率提高有关。3种不同工厂生产的虫草菌丝体,应用放射性同位素法检测对大小鼠脑内MAO-B活性的影响。结果3种药物的2种浓度(l:1,1:10)对MAO-B活性呈显着的抑制作用(P<0.01),提示该药对延缓衰老和老年保健具有一定的意义。