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中国药典中药材品种

2017-09-27酸枣仁

酸枣仁
一、酸枣仁药典标准
酸枣仁
Suanzaoren
ZIZIPHISPINOSAESEMEN
    本品为鼠李科植物酸枣ZiziphusjujubaMill.var.spinosa(Bunge)HuexH.F.Chou的干燥成熟种子。秋末冬初采收成熟果实,除去果肉和核壳,收集种子,晒干。
    【性状】本品呈扁圆形或扁椭圆形,长5~9mm,宽5~7mm,厚约3mm。表面紫红色或紫褐色,平滑有光泽,有的有裂纹。有的两面均呈圆隆状突起;有的一面较平坦,中间有1条隆起的纵线纹;另一面稍突起。一端凹陷,可见线形种脐;另端有细小突起的合点。种皮较脆,胚乳白色,子叶2,浅黄色,富油性。气微,味淡。
    【鉴别】(1)本品粉末棕红色。种皮栅状细胞棕红色,表面观多角形,直径约15μm,壁厚,木化,胞腔小;侧面观呈长条形,外壁增厚,侧壁上、中部甚厚,下部渐薄;底面观类多角形或圆多角形。种皮内表皮细胞棕黄色,表面观长方形或类方形,垂周壁连珠状增厚,木化。子叶表皮细胞含细小草酸钙簇晶和方晶。
    (2)取本品粉末1g,加甲醇30ml,加热回流1小时,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇0.5ml使溶解,作为供试品溶液。另取酸枣仁皂苷A对照品、酸枣仁皂苷B对照品,加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以水饱和的正丁醇为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%香草醛硫酸溶液,立即检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
    (3)取本品粉末1g,加石油醚(60~90℃)30ml,加热回流2小时,滤过,弃去石油醚液,药渣挥干,加甲醇30ml,加热回流1小时,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇2ml使溶解,作为供试品溶液。另取酸枣仁对照药材1g,同法制成对照药材溶液。再取斯皮诺素对照品,加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取上述三种溶液各2μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以水饱和的正丁醇为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%香草醛硫酸溶液,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同的蓝色荧光斑点。
    【检查】杂质(核壳等) 不得过5%(通则2301)。
    水分 不得过9.0%(通则0832第二法)。
    总灰分 不得过7.0%(通则2302)。
    黄曲霉毒素 照黄曲霉毒素测定法(通则2351)测定。
    取本品粉末(过二号筛)约5g,精密称定,加入氯化钠3g,照黄曲霉毒素测定法项下供试品的制备方法,测定,计算,即得。
    本品每1000g含黄曲霉毒素B1不得过5μg,含黄曲霉毒素G2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素B2和黄曲霉毒素B1的总量不得过10μg。
    【含量测定】酸枣仁皂苷A 照高效液相色谱法(通则0512)测定。
    色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以水为流动相B;按下表中的规定进行梯度洗脱;蒸发光散射检测器检测。理论板数按酸枣仁皂苷A峰计算应不低于2000。
    时间(分钟) 流动相A(%)     流动相B(%)
    0~15                 20→40           80→60
    15~28                40               60
    28~30                40→70           60→30
    30~32                70→100          30→0
    对照品溶液的制备 取酸枣仁皂苷A对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液,即得。
    供试品溶液的制备 取本品粉末(过四号筛)约1g,精密称定,置索氏提取器中,加石油醚(60~90℃)适量,加热回流4小时,弃去石油醚液,药渣挥去溶剂,转移至锥形瓶中,加入70%乙醇20ml,加热回流2小时,滤过,滤渣用70%乙醇5ml洗涤,合并洗液与滤液,回收溶剂至干,残渣加甲醇溶解,转移至5ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
    测定法 分别精密吸取对照品溶液5μl、20μl,供试品溶液10μl,注入液相色谱仪,测定,用外标两点法对数方程计算,即得。
    本品按干燥品计算,含酸枣仁皂苷A(C58H94O26)不得少于0.030%。
    斯皮诺素 照高效液相色谱法(通则0512)测定。
    色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以水为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为335nm。理论板数按斯皮诺素峰计算应不低于2000。
    时间(分钟) 流动相A(%)     流动相B(%)
    0~10                 12→19           88→81
    10~16                19→20           81→80
    16~22                20→100          80→0
    22~30                100              0
    对照品溶液的制备 取斯皮诺素对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液,即得。
    供试品溶液的制备 取酸枣仁皂苷A〔含量测定〕项下的续滤液,作为供试品溶液。
    测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
    本品按干燥品计算,含斯皮诺素(C28H32O15)不得少于0.080%。
    饮片
    【炮制】酸枣仁 除去残留核壳。用时捣碎。
    【性状】【鉴别】【检查】(水分总灰分)【含量测定】同药材。
    炒酸枣仁 取净酸枣仁,照清炒法(通则0213)炒至鼓起,色微变深。用时捣碎。
    本品形如酸枣仁。表面微鼓起,微具焦斑。略有焦香气,味淡。
    【检查】水分 同药材,不得过7.0%。
    总灰分 同药材,不得过4.0%。
    【鉴别】【含量测定】同药材。
    【性味与归经】甘、酸,平。归肝、胆、心经。
    【功能与主治】养心补肝,宁心安神,敛汗,生津。用于虚烦不眠,惊悸多梦,体虚多汗,津伤口渴。
    【用法与用量】10~15g。
    【贮藏】置阴凉干燥处,防蛀。


二、酸枣仁化学成分
酸枣仁含生物碱:酸枣仁碱(sanjoinine)A、B、D、E、F、G1、G2、Ia、Ib、K,其中碱A就是欧鼠李叶碱(frangu-foline),碱E就是荷叶碱(nuciferine),碱Ia就是原荷叶碱(nornu-ciferine),碱Ib就是去甲异紫堇定(norisocorydine),碱K就是右旋的衡州乌药碱(coclaurine),N-甲基巴婆碱(N-methylasimilo-bine),酸李碱(zizyphusine),5-羟基-6-甲氧基去甲阿朴啡(caaver-ine,5-hydroxy-6-methoxynoraporphine),安木非宾碱(amphibine)D。还含酸枣仁环肽(sanjoinenine)。还含三萜类:白桦脂酸(betulinic acid),白桦脂醇(betulin),美洲茶酸(ceanothic acid),麦珠子酸(alphitolic acid),酸枣仁皂苷A(jujuboside)、酸枣仁皂苷B,以及胡萝卜苷(daucosterol)。又含黄酮类:斯皮诺素(spinosin),即是2-O-β-D-吡喃葡萄糖基当药素(2-O-β-D-glucopyrano-sylswertisin),酸枣黄素(zivulgarin),6'''-芥子酰斯皮诺素(6'''-sinapoylspinosin),6'''-阿魏酰斯皮诺素(6'''-feruloylspinosin),6'''-对香豆酰斯皮诺素(6'''-p-coumaroylspinosin),当药黄素(swertisin),6,8-二-C-葡萄糖基芹菜素(vicenin Ⅱ),芹菜素-6-C-[(6-O-对羟基苯甲酰)-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖甙[apigenin-6-C-[(6-O-p-hydroxybenzoyl)-β-D-glucopyranosyl(1→2)]-β-D-glucopyranoside]等。还含L-苏氨酸(L-threonine),L-缬氨酸(L-valine),L-蛋氨酸(L-methionine),L-亮氨酸(L-leucine),L-异亮氨酸(L-isoleucine),L-赖氨酸(L-lysine),L-苯丙氨酸(L-phenylalanine)等17种氨基酸和钾、钠、钙、锌、铁、铜、锰等多种金属元素。又含阿魏酸(ferulic acid),维生素C及植物甾醇,环磷酸腺苷(cyclic adenosine 3',5'-monophosphate)等。

三、酸枣仁药理作用
1.镇静催眠作用:酸枣仁水溶性提取物,每ml相当于7.5g生药,将原液稀释为1:1,l:0.5,1:0.25 3种浓度,pH=9,用量每20g用1.0ml。
1.1.对小白鼠一般活动的影响:1.1.1.直接观察法试验:取体重18.0±1.0g小白鼠,各半,给药前先观察其正常活动情况,然后给予不同浓度酸枣仁水溶性提取物1.0ml/20g ig。
1.1.2.光电镇静法试验:用十字交叉光束的二个光导管串联组成光电镇静器,用积数器记录10分钟内小鼠自发活动次数。在药物浓度为1:1与1:0.7组小鼠活动显着减少。
1.1.3.排水量法试验:参考Komlos等的抖笼排水装置用单位时间内的排水量表示小白鼠的活动情况。小白鼠分为大剂量组(1 :0.5),小剂量组(1 :0.25)和对照组,1次ig给药,30分钟后开始观察15、30分钟内排水量,1:0.5药物组比对照组排水量显着减少(P<0.01)。
1.1.4.抖笼法试验:选体重18±1.0g小鼠,随机分两组,每组10只,给药组用 1:1酸枣仁水溶液ig 1.0ml/20g体重,30分钟后放入抖笼内观察10分钟内活动情况。结果给药组自发活动明显降低。酸枣仁石油醚提取液、正丁醇萃取液、乙酸乙酯萃取液(以上的提取液每1ml相当原生药10g)水煎剂(浓度为每1ml相当原生药1g),pinosin配成每1ml相当原生药1mg。采用抖笼法自身对照试验。结果见表4,除石油醚提取液无效外,均显示明显的降低自发活动。
1.2.降低协调运动:选取体重18±1.0g 小白鼠,在滚笼上转1h,不落下者为合格。取40只,按体重性别随机分4组,给予不同剂量酸枣仁水提物(每1ml相当7.5g生药,并稀释为1:1,1 :0.5,1 :0.7)与生理盐水对照,用滚笼法进行实验,滚笼转速为 6.5wk/分钟,每次放入10只小白鼠,ig给药30分钟后放入滚笼,连续转60分钟,观察动物落下只数,结果见表5。3种浓度均落下60%以上,与盐水组对照有非常显着差异。
1.3.对动物睡眠的影响:1.3.1.酸枣仁水溶性提取物与戊巴比妥钠作用的影响:取18.0±1.0g小白鼠20只,按体重、性别随机分为二组。一组给酸枣仁水溶提取物(每ml 相当7.5g生药,稀释为 1:1);另一组给等容量生理盐水作对照,ig给药后30分钟,每只小鼠ip 0.2%戊巴比妥钠 0.1ml/10g,每5分钟进行一次翻正反射试验直至翻止反射消失,记录30分钟内消失只数,酸枣仁水溶性提取物能加强戊巴比妥钠催眠作用。酸枣仁水溶性提取物还能显着延长戊巴比妥钠对小白鼠的睡眠时间(P<0.05),但不及氯丙嗪(P<0.01)。
1.3.2.炒枣仁煎剂对大鼠睡眠的影响:Wistar大鼠18只,体重160-240g。随机分为实验组与对照组,置于有机玻璃圆筒内单独饲养,活动不受限制,自由摄食和饮水,保持自然光照,在戊巴比妥钠麻醉下安装皮层电极,用于记录脑电。在两侧颞肌和颈肌内分别插入银丝电极以记录肌电,连续记录6小时,每只大鼠在ig前记录3天,ig后记录3天。炒枣仁煎剂每1ml相当于原生药0.5g。实验组用炒枣仁煎剂ig,每次1ml,每日2次,自记录睡眠的d3晚上开始给药,共3天。对照组用等量生理盐水。睡眠资料分析采用目测法,每30秒为一分段时间。睡眠觉醒周期分为:1)觉醒期以额-顶叶引导出的低幅快波脑电和明显的肌电活动为特征;2)慢波睡眠(Slow wave sleep,SWS)以梭形波(10-15Hz)和高幅慢波(Q波。0.5-5Hz)为特征,该期肌电活动明显减少。其中Q波少于50%者为慢波睡眠第1期(SWS1),相当于浅睡阶段;Q波超过50%者为慢波睡眠第2期(SWS2),相当于深睡阶段;3)快波睡眠(Paradoxical sleep,PS)以低幅快波(6-9H2)的脑电为特征、除偶而有肌肉抽动外无明显的肌肉活动;4)总睡眠时相(TS)包括SWS1、SWS2和PS。全部实验资料以均值±标准误(X±SD表示,用t检验统计处理。结果:实验组大鼠ig后TS和SWS2持续时间明显增长,与ig前相比,6小时内TS持续时间平均增加51.0分钟(26.O%),SWS2持续时间平均增加41.4分钟(116.3%),差异均非常显着(P<0.001)。SWS1和PS持续时间无明显变化。对照组ig生理盐水前后未见明显变化。实验组ig后TS与SWS2的发作频率与发作持续时间均有明显变化。与ig前相比,6h内TS发作频率平均减少22.7次(-36.3%),每次发作持续时间增加3.5分钟(+95.6%);6小时内SWS2发作频率平均增加28.3次(+89.O%),均有非常显着的意义(P<0.001),而SWS2每次发作的持续时间延长0.3小时(+31.6%),有统计学意义(P<0.05)。对照组ig前后对发作频率和发作的持续时间则无显着变化。在实验中还发现ig后多数大鼠的脑电图波型有明显变化,主要表现在慢波睡眠阶段高幅慢波增多,波幅增大,频率变慢,尤其是ig前睡眠量较少的大鼠更为明显。对照组在ig前后未见明显变化。
1.3.3.酸枣仁有效成分对大鼠多导睡眠描记的影响:酸枣仁用石油醚脱脂后加水抽提,再加硫酸铵至一定饱和度,析出沉淀,加水溶解,并滤去不溶物,清液调pH至3.O后,用阳离子交换柱层析,先用水洗至中性,然后用NH4OH洗脱并分部收集得两部分,分别为1.90g(SZ1)和1.86g(SZ2)。SZ1和SZ2均用生理盐水(NS)配成4g/L。在描记开始前lh按20mg/kg体重作ip。大鼠随机分3组,每组11只,分别 ip SZ1、SZ2和NS,多导睡眠描记,为了避免昼夜节律对实验影响,描记在每天同一时间进行(下午2:00-6:00)。每只大鼠均在给药前ld和当天各连续描记4h,大鼠睡眠按Usdin法。结果以均值±标准差(X±SD)表示,用t检验统计处理。结果:SZ1和SZ2组给药后睡眠总时间(TST)和慢波睡眠(SWS)显着增多,而觉醒(W)显着减少,与给药前lh相比,TST分别增加21.7±19.4分钟(±17.2%,P<0.001)和27.7±18.5分钟(+20.O%,P<0.001);SWS分别增加20.O±18.6分钟(+17.O%,P<0.01)和28.2±19.0分钟(+21.9%,P<0.001),其中慢波睡眠深睡期(SWS2)分别增加8.4±12.1分钟(+48.8%,P<0.005)和25.3±19.4分钟(+138.2%,P<0.01);W分别减少21.7±19.4分钟(-19.O%,P<0.01)和27.7±18.5分钟(-27.3%,P<0.001),而慢波睡眠浅睡期(SWS1)和快波睡眠(PS)均无显着变化,NS组给药前后各时相均无显着变化。从有效成份时间效应关系看,给药当天与前ld同一时间的每小时TST和SWS2相比较,分析SZ1和SZ2的时间效应关系。又从给药后TST和SWS2效应达高峰的时间来看,SZ1在h4-5,效应达高峰时TST和SWS,分别增加45.3%(P<0.01)和186.7%(P<0.005),而SZ2在第3-4小时,效应达高峰时TST和SWS2分别增加23.6%(P<0.05)和191.4%(P<0.01)。
1.4.对抗中枢兴奋剂的作用:1.4.1.对抗戊四氮的作用:取体重18±1.0g小鼠,各半,随机分3组。一组用酸枣仁水溶性提取物(每1ml相当7.5g生药,稀释成1:1)1.0m1/20g,分两次ig,中间相隔30分钟,用药30分钟后ip戊四氮半数惊厥量50mg/kg,观察给药后,产生全身阵挛性惊厥的只数及死亡率。对照用生理盐水。结果表明,酸枣仁水溶性提取物对戊四氮引起的惊厥有对抗作用。
1.4.2.对抗咖啡因的作用:选体重18.0±1.0g小鼠20只,各半,按体重、性别随机分二组,一组给1:1酸枣仁水溶性提取物1.0m1/20g(每1ml相当7.5g生药,稀释成1 :1),分二次给药,中间相隔30分钟,末次给药30分钟后,给苯甲酸钠咖啡因50mg/kg。对照用生理盐水,末次给药30分钟后给苯甲酸钠咖啡因50mg/kg,用抖笼描记法记录二组小鼠30分钟内活动曲线。结果酸枣仁水溶性提取物可使描记曲线降低。
1.4.3.抗士的宁所致的小鼠惊厥作用表明:小鼠ip酸枣仁0.3ml/10g无明显的对抗作用。
2.对心血管系统的作用:2.1.酸枣仁对实验性心律失常的影响:2.1.1.对氯化钡所致大鼠心律失常的作用:大鼠39只,体重110-180g,雌雄不拘,分成两组,酸枣仁组20只,对照组19只。Ip 3%戊巴比妥钠1ml/kg麻醉后,再 ip 10%水合氯醛 2ml/kg 5分钟后,用RM-46型生理记录仪观察并记录Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ导联心电图。然后从舌下iv0.4%氯化钡溶液1ml/kg,5秒内注完;待其出现心律失常后,给药组从舌下iv上述酸枣仁水溶液2ml/kg,对照组注射同量生理盐水,观察10分钟内心电图的变化。注射氯化钡后,39只大白鼠均立即出现以双相性室性心动过速为主的心律失常波形。酸枣仁组给药后平均在20秒(14只在10秒以内)即转为窦性正常节律,观察至10分钟未再出现心律失常波形。对照组给生理盐水后心电图无明显变化,心律失常持续时间为1-10分钟。
2.1.2.对乌头碱所致大鼠心律失常的作用:大鼠27只,体重110-220g,酸枣仁组14只,对照组3只。用戊巴比妥钠ip麻醉(剂量同上)。用RM一46型生理记录仪观察并记录心电图的变化。以0.002%乌头碱1ml/kg舌下iv,当出现心律失常后,给药组iv酸枣仁溶液2ml/kg,对照组iv同量生理盐水,观察并比较两组15分钟内心电图的变化。注射乌头碱后,数秒至4分钟内均出现室性早搏二联律、室性心动过速等心律失常波形。酸枣仁组的14只大白鼠中有8只心电图波形有好转(即能恢复窦性节律数分钟,以后又出现心律失常,较短时间又自行恢复,如此反复数次);而生理盐水组13只大白鼠,全部在 15分钟内持续出现心律失常波形。两组结果用X2测验直接计算概率法,测得P<0.01,相差非常显着。
2.2.酸枣仁对脑垂体后叶素引起大鼠心肌缺血的影响:2.2.1.ip给药组:取大鼠18只,体重160-220g,分成二组,每组9只,麻醉后一组预先ip酸枣仁溶液4ml/kg (1ml相当生药1g),另一组用生理盐水。10分钟后分别由舌下iv脑垂体后叶素注射液0.5u/kg,用XDH-3型心电图仪记录注射后1、2、15、30秒和1、2、5、10分钟 时心电图第Ⅱ导联的变化。
2.2.2.iv给药组:取大鼠10只,体重160-290g,每组5只,麻醉后,一组预先从舌下iv酸枣仁溶液1.5ml/kg,另一组iv生理盐水。2分钟后,舌下iv脑垂体后叶素0.75u/kg,同上法记录各个时间的心电图变化。凡在下述第一期及第二期中各出现一项心电图变化者,定为有心肌缺血。心肌缺血的指征:第一期T波比原水平高50%以上,或S一T段明显下移或出现期前收缩。第二期S-T段明显下移或T波倒置低平,心率明显减慢。用X测验直接计算概率法分别测定ip及iv的酸枣仁组与生理盐水组出现心肌缺血的差异,结果都非常显着(P<0.01)。
2.3.对心脏的作用:酸枣仁液可使离体和在体蛙心的心率减慢,心收缩力加强,有强心作用。
3.对微循环的作用:酸枣仁液可使微血管管径扩张极为显着。
4.对动物抗缺氧能力的影响:用成年小鼠120只,根据体重随机分为:缺氧对照组、酸枣仁组,每组60只。减压缺氧前一天下午ig每只小鼠酸枣仁煎剂0.4ml(含生药0.1g)缺氧对照组ig蒸馏水0.4ml。减压缺氧前2小时重复ig一次,剂量同上。动物进入减压装置后,先快速(1000m/分钟)减压至 3000m模拟高度,然后缓速(200m/分钟)至10,000m,停l小时后回到平原高度,计算动物存活率。结果对照组存活27只,用药组存活48只,P<0.01。并用成年小鼠观察模拟高度后脑组织的氧耗量,结果用药组与对照组和平原对照组比较,P<0.05和0.01。用药后显着减少脑组织的氧耗量。
5.免疫增强作用:酸枣仁乙醇提取褐色浸膏物明显提高小鼠淋巴细胞转化值,对小鼠抗体溶血素生成也明显高于对照组,能明显增强小鼠的单核巨噬细胞的吞噬功能,可明显增加小鼠的迟发型超敏反应并能拮抗CPA引起的迟发型超敏反应的抑制。酸枣仁及多糖每天口服0.1g/kg,共给药16天,能增强小鼠的体液免疫和细胞免疫功能,并且对放射性损伤小鼠有一定保护作用。
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